黃芪甲苷為糖尿病大鼠造影劑腎病的保護(hù)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：隨著影像學(xué)和介入診治技術(shù)的迅速發(fā)展，造影劑在臨床的應(yīng)用也越來越廣泛，在檢查和治療中發(fā)揮著越來越重要的作用。然而由造影劑導(dǎo)致的急性腎損傷即造影劑腎病(CIN)已成為常見的醫(yī)院醫(yī)源性疾病。CIN患者預(yù)后差、并發(fā)癥發(fā)生率高、住院時(shí)間長、死亡率高；因CIN需住院進(jìn)行透析的患者，近30％出院前死亡。CIN的致病機(jī)制是靜注造影劑可導(dǎo)致血漿滲透壓改變，使腎素-血管緊張素系統(tǒng)興奮和腎內(nèi)前列腺素分泌減少，從而導(dǎo)致腎缺血；造影劑能使腎小管上皮細(xì)胞缺水

2、及直接毒性作用使腎小管損傷，能使紅細(xì)胞變形、皺縮、凝集，從而減少腎血流，還可引發(fā)自身免疫反應(yīng)。CIN的高危因素包括腎功能不全和繼發(fā)性糖尿病腎病患者、高齡（年齡＞70歲）、脫水、合并應(yīng)用腎毒性藥物（如氨基糖苷類抗生素、非甾體抗炎藥）、血容量不足、充血性心力衰竭，以及使用大劑量造影劑或離子型高滲造影劑、72小時(shí)之內(nèi)重復(fù)使用造影劑等。CIN在我國目前呈現(xiàn)一種高風(fēng)險(xiǎn)、高發(fā)病率、低認(rèn)知的局面，同一患者如果存在多種CIN的危險(xiǎn)因素，在沒有預(yù)防措施的

3、情況下應(yīng)用造影劑后，CIN的危險(xiǎn)性會增加約50％，約15％患者甚至需要進(jìn)行透析治療。目前尚無有效措施逆轉(zhuǎn)CIN病程進(jìn)展，正確認(rèn)識CIN危險(xiǎn)因素、辨別高?；颊卟⒔o予適當(dāng)預(yù)防和保護(hù)措施可有效降低CIN發(fā)病率，所以CIN的預(yù)防是關(guān)鍵。CIN的預(yù)防措施包括患者分層、水化、限量、藥物預(yù)防。選擇離子型水溶性有機(jī)碘制劑泛影葡胺為代表造糖尿病大鼠腎臟損傷模型，泛影葡胺是一種泛影酸鹽，其化學(xué)結(jié)構(gòu)為單體離子型苯環(huán)碘，其滲透壓高達(dá)1400～2000mOsm.

4、kg，具有高滲性，是臨床常規(guī)應(yīng)用的心血管和尿路造影劑。中藥黃芪對糖尿病腎病有治療作用，而黃芪主要成分之一黃芪甲苷(AsⅣ)對CIN是否具有保護(hù)與改善作用尚有待研究，因此本課題擬探討黃芪甲苷(AsⅣ)對糖尿病大鼠模型泛影葡胺造影劑所致腎損傷的保護(hù)作用，并從腎功能基本指標(biāo)的改善、炎性因子水平、抗氧化應(yīng)激等方面研究與探討黃芪甲苷對造影劑腎損傷的保護(hù)作用機(jī)制。
　　 方法：Wistar雄性大鼠60只隨機(jī)分成4組，每組15只，除正常對照組

5、(C組)外、其余大鼠用鏈脲佐菌素造糖尿病大鼠模型，造模成功41只，隨機(jī)分為：模型對照組(DM組)、造影劑組(CM組)：尾靜脈內(nèi)一次性注入60％泛影葡胺DTZ（10ml·kg-1）；黃芪甲苷干預(yù)組(AsⅣ組)。AsⅣ組黃芪甲苷灌胃4mg·d-1·kg-1，其余各組灌胃等體積生理鹽水，每天8：00-9:00灌胃，共21d。飼養(yǎng)期間觀察各組大鼠飲食、飲水、尿量、精神狀態(tài)、活動(dòng)情況、毛色等一般情況。實(shí)驗(yàn)第20天收集各組大鼠24h尿液，第21天結(jié)

6、束后大鼠空腹6h后稱重，麻醉下腹主動(dòng)脈插管收集血標(biāo)本，處理備用；取腎臟，處理后稱重，稱重后處理備用。經(jīng)備用樣品指標(biāo)檢測，比較各組大鼠血糖、腎臟肥大指數(shù)（腎重/體重）、尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、尿微量白蛋白（UmAlb）、尿α1-微球蛋白(Uα1-MG)水平，24小時(shí)尿蛋白(UP24)等腎功能相關(guān)指標(biāo)，比較各組血清IL-6水平、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、脂質(zhì)過氧化代謝產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量的改變，觀察腎臟病理顯微結(jié)構(gòu)。<

7、br>　　 結(jié)果：與正常對照組比較，模型對照組大鼠血糖維持在較高水平、腎臟肥大指數(shù)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、UP24、UmA1b、Uα1-MG水平、血清IL-6均明顯升高，血清SOD活性低下，MDA含量增加，表明糖尿病大鼠模型造模成功；與模型對照組比較，造影劑組上述除血糖的各項(xiàng)指標(biāo)均進(jìn)一步惡化，表明造影劑對糖尿病模型大鼠腎臟具有一定的損害作用；與造影劑組相比，黃芪甲苷干預(yù)組的腎臟肥大指數(shù)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、U

8、P24、UmA1b、Uα1-MG、IL-6水平明顯改善，腎臟的各項(xiàng)功能指標(biāo)得到了有效改善。血清SOD活性明顯增強(qiáng)，MDA含量減少，表明黃芪甲苷增加了造影劑腎損傷大鼠的抗氧化應(yīng)激能力。組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)造影劑組大鼠腎小管上皮細(xì)胞空泡變性、刷狀緣變薄或消失，甚至發(fā)生大片上皮細(xì)胞脫落，黃芪甲苷干預(yù)組較造影劑組組織學(xué)改變有所改善，表明經(jīng)過黃芪甲苷的干預(yù)能夠改善造影劑造成的腎臟損害情況。
　　 結(jié)論：對糖尿病造影劑腎損傷大鼠，通過連續(xù)21d灌