胃癌腹膜轉移相關蛋白Myosin--9促進胃癌的侵襲和轉移.pdf

1、南方醫(yī)科大學2011級博士學位論文胃癌腹膜轉移相關蛋白Myosin一9促進胃癌的侵襲和轉移Peritonelmetastasisassociatedprotein】V【yosin一9inducesmigrationandinVasionofgastriccancer課題來源：自選課題學位申請人導師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院答辯委員會主席答辯委員會委員張磊李國新教授外科學學術型博士研究生第一臨床醫(yī)學院蘭平教授_一l。7、1，～雷

2、建教授張玉新教授黃宗海教授黃祥成教授2014年5月21日廣州摘要是以雙相凝膠電泳(Twodimension2Llp01yac巧一l觚lidegelelec仃ophoresis，2DE)為主的蛋白質(zhì)分離技術和以質(zhì)譜(maSsspec仃ome仃y，MS)、生物信息學(Bioinfonnatics)為主的蛋白質(zhì)鑒定技術。目前已經(jīng)有許多新的差異蛋白質(zhì)組分析方法用于實踐，其中熒光差異凝膠電泳(di毹rencegelelec仃ophoresis，D

3、IGE)技術由于繼承了二維凝膠電泳(似odimensionalelec仃ophoresis，2DE)的高分辨率，同時又具備高重現(xiàn)性、高靈敏度、高通量和高動態(tài)范圍等優(yōu)勢，使得DIGE日益受到關注，成為最受歡迎的定量蛋白質(zhì)組學研究手段之一。DIGE技術通過對用不同的熒光染料對不同的蛋白樣品進行標記，在同一塊雙向凝膠中可同時分離多種蛋白樣品，并且每塊膠上均引入了內(nèi)標，內(nèi)標可以進一步增加可信度，確保結果能反映出真實的生物學差異，避免了系統(tǒng)誤差對

4、實驗結果的影響。目前，蛋白質(zhì)組學技術已在多種腫瘤中用于篩選和鑒定同早期診斷、預后以及化療敏感性等相關的腫瘤標記物。綜上所述，本課題主要關注的是尋找同胃癌腹膜轉移相關的蛋白質(zhì)，并選擇其中一個差異蛋白進行進一步的功能驗證和機制的初步研究。實驗的第一部分使用2DDIGE分離結合MALDITOF／TOF質(zhì)譜對胃癌組織和相應腹膜轉移組織的差異表達蛋白質(zhì)進行篩選鑒定，共鑒定出27種蛋白質(zhì)。其中在胃癌腹膜轉移組織中表達上調(diào)的有23個蛋白質(zhì)，表達下調(diào)的

5、有4個蛋白質(zhì)，這為今后研究奠定了基礎。然后利用生物信息學分析發(fā)現(xiàn)在上述這些差異蛋白中，Myosin9蛋白可能在肌動蛋白細胞骨架重組、肌動蛋白纖維運動、血管生成、細胞細胞間黏附以及蛋白轉運等生物過程中發(fā)揮重要作用，根據(jù)以上結果我們推測Myosin9可能參與了胃癌的侵襲和轉移過程。因此第二和第三部分我們對Myosin9進行了更深入的研究，結果發(fā)現(xiàn)抑制Myosin9的表達后，細胞的遷移和侵襲能力減弱，而粘附能力增加，裸鼠腹腔播散腫瘤結節(jié)形成數(shù)