E2F8在肝癌細胞分化中作用的研究及利用RNA干擾技術篩選潛在的肝癌驅(qū)動性突變基因.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文對E2F8在肝癌細胞分化中的作用及利用RNA干擾技術篩選潛在的肝癌驅(qū)動性突變基因進行了研究。本研究包括兩個方面:
   第一部分:探討E2F家族中的一個非典型成員之一E2F8在肝癌細胞周期以及分化中的作用。本實驗室之已有研究發(fā)現(xiàn)E2F8基因在肝癌病人樣本中表達上調(diào),E2F8基因通過調(diào)控細胞周期素cyclinD1的表達影響細胞周期,從而調(diào)控肝癌細胞的生長。本研究中,我們進一步探討了E2F8對肝癌細胞分化的影響。在肝癌細胞中RN

2、A干擾E2F8表達后,通過定量PCR以及蛋白免疫印記技術檢測我們發(fā)現(xiàn)Nanog、Sox2、Oct-4、DLK1等胚胎干細胞/干祖細胞的早期分子標志物表達上調(diào),而成熟肝臟細胞分子標志物ALB則明顯的表達下調(diào);此外,在部分肝癌細胞株中將E2F8以及E2F8-DBD過表達后可以觀察到Nanog的表達下調(diào);在成球的肝癌細胞中中以及普通的肝癌細胞中用腺病毒干擾E2F8后進行成球克隆形成試驗發(fā)現(xiàn)成球的個數(shù)增多以及球克隆變大。進一步研究發(fā)現(xiàn)RNA干擾

3、E2F8表達后Ezh2和Suz12的表達水平上調(diào),通過CHIP實驗我們證明了E2F8可以與Ezh2的啟動子相結合從而發(fā)揮調(diào)控作用。我們的最新研究結果表明E2F8通過調(diào)控Ezh2和Suz12的表達對肝癌細胞的細胞周期以及分化進程起著重要的作用。
   第二部分:利用RNA干擾技術篩選細胞生長相關的肝癌突變基因從而鑒定肝癌癌變驅(qū)動性突變基因。肝細胞性肝癌是一種很常見的癌癥,它通常具有浸潤和轉(zhuǎn)移的遺傳易感性。在這里,我們在對十例伴有門

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