黃精水煎劑對β-淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降的保護作用及其機理研究.pdf

1、目的:在體內(nèi)和體外條件下,探討黃精水煎劑(PCD)對β-淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)誘導(dǎo)的阿爾茨海默病(AD)模型的干預(yù)作用及可能機制。
　　方法:40只大鼠隨機分為4組,每組10只(對照組,AD模型組,PCD低劑量組(15g/kg·d)和高劑量組(30g/kg·d))。通過微量注射Aβ25-35至大鼠雙側(cè)海馬CA1區(qū),建立大鼠AD模型,用高、低劑量的PCD對AD模型大鼠灌胃干預(yù)2周。運用Morris水迷宮檢測PCD對A

2、D模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力的影響;生化方法檢測大鼠海馬組織內(nèi)谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽還原酶(GR)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;利用H&E染色,觀察PCD對AD模型大鼠海馬組織病理性損傷的影響;利用免疫組化和免疫蛋白印跡方法,評價PCD對AD模型大鼠CA1區(qū)細胞中異常磷酸化tau蛋白(P-tau)表達的影響;利用培養(yǎng)的人神經(jīng)母細胞瘤SH-SY5Y細胞(SSC),采用MT

3、T法檢測不同濃度Aβ25-35(0-30μM)對細胞活性的影響,并觀察PCD(20,40mg/mL)對Aβ25-35誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷的保護作用。
　　結(jié)果:
　　1.雙側(cè)海馬注射Aβ25-35可模擬人病理發(fā)展進程,誘導(dǎo)大鼠AD模型,損傷大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力,并造成大鼠海馬組織損傷。
　　2.PCD(15,30g/kg)可使大鼠的逃避潛伏期降低、游泳距離縮短,學(xué)習(xí)記憶能力改善,表明PCD對Aβ25-35誘導(dǎo)的大鼠學(xué)習(xí)記憶能

4、力損傷有保護作用。
　　3.PCD(15,30g/kg)能改善Aβ25-35引起的大鼠海馬組織損傷。H&E染色表明,PCD使海馬神經(jīng)元數(shù)目增加,核濃縮范圍減小。
　　4.免疫組化和免疫蛋白印跡結(jié)果顯示,PCD(15,30g/kg)能降低大鼠海馬CA1區(qū)Thr231位點P-tau蛋白表達量。
　　5.生化檢測結(jié)果顯示,PCD(15,30g/kg)能提高大鼠海馬組織中抗氧化酶活力(GSH-Px、GR、SOD),提高GSH含

5、量,并降低MDA含量,降低氧化應(yīng)激程度。
　　6.在體外模型中,不同濃度的Aβ25-35(1-30μM)以濃度依賴的方式引起SSC損傷,降低細胞活性;Aβ25-35對SSC的IC50為10μM。PCD(20,40mg/mL)可顯著提高SSC活力。
　　結(jié)論:PCD對Aβ25-35引起AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶損傷有保護作用,其保護機制可能與提高抗氧化酶活力、降低氧化應(yīng)激程度、降低tau蛋白異常磷酸化水平和抑制Aβ25-35誘導(dǎo)的