骨髓及人臍帶源干細胞治療大鼠慢性腎損傷的實驗研究.pdf

1、慢性腎臟病在臨床較為常見，最終引起慢性腎功能不全，導致機體多臟器受累，目前尚缺乏有效的治療方法，延緩及修復慢性腎損傷是一個亟待解決的問題。近年來干細胞移植用于腎臟病治療被廣泛研究，越來越多的證據(jù)肯定了干細胞在急性腎損傷方面的治療效果，但干細胞用于慢性腎損傷方面的治療研究較少，是否有明確的治療作用尚不肯定。因此，我們采用大鼠腎臟大部分切除手術建立大鼠慢性腎損傷模型，應用同種異體骨髓單個核細胞及人臍帶源間充質(zhì)干細胞心內(nèi)注射方法進行干細胞移植

2、，研究干細胞對大鼠慢性腎損傷的保護作用及相關分子機制。
　　目的：建立大鼠腎臟大部分切除模型，研究骨髓單個核細胞及人臍帶源間充質(zhì)干細胞移植對慢性腎損傷大鼠尿蛋白排泄、腎功能、腎組織病理學及腎組織TGF-β1、CTGF及TIMP-1表達的影響，探討干細胞對慢性腎損傷的治療效果及作用機制。
　　方法：采用改良腎臟5/6切除術建立大鼠慢性腎損傷模型，造模成功后隨機分為非治療組（NT組），骨髓單個核細胞治療組（MT1組），人臍帶源間

3、充質(zhì)干細胞治療組（MT2組）以及骨髓單個核細胞與人臍帶源間充質(zhì)干細胞混合治療組（MT3組）,并設立正常對照組（C組）。按分組情況分別采用等量生理鹽水、同種異體骨髓單個核細胞1x108個、人臍帶源間充質(zhì)干細胞1x105個、同種異體骨髓單個核細胞與人臍帶源間充質(zhì)干細胞混合液（兩者各半量）心內(nèi)注射。治療4周后，檢測各組大鼠的24小時尿蛋白定量、血清尿素、肌酐，普通光鏡及電鏡下觀察各組大鼠腎臟病理改變，通過免疫組化及蛋白印跡方法觀察腎組織TGF

4、-β1、CTGF及TIMP-1的表達情況。
　　結果：1.尿蛋白排泄及腎功能：各治療組大鼠的尿蛋白排泄、血清尿素、肌酐均較非治療組大鼠降低，除MT3組大鼠尿素與NT組比較無統(tǒng)計學差別外，其余各治療組大鼠與NT組比較尿蛋白排泄及腎功能改善均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但各治療組間無顯著差別(P＞0.05)。2.腎臟組織病理學分析：各治療組大鼠腎組織與非治療組比較，系膜增生、系膜外基質(zhì)沉積、腎小球損傷及硬化較輕，腎間質(zhì)炎細胞浸潤、腎

5、間質(zhì)面積及間質(zhì)纖維化改變較輕，腎小球基質(zhì)相對面積、腎小球硬化指數(shù)明顯降低(P<0.05)，但各治療組間無明顯差別(P＞0.05)；電鏡結果提示各治療組大鼠足細胞損傷相對非治療組改變輕微。3.免疫組織化學檢測：TGF-β1及TIMP-1在正常組大鼠的腎小球上皮細胞和腎小管上皮細胞有少量表達；在非治療組腎小球系膜細胞、上皮細胞、系膜區(qū)和腎小管上皮細胞均有表達。各治療組與非治療組比較TGF-β1及TIMP-1表達減弱（P＜0.05），但各治療

6、組間無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。4.蛋白印跡結果：各治療組腎組織TGF-β1及CTGF表達較NT組減弱（P＜0.05），各治療組間無顯著差別(P＞0.05)。
　　結論：骨髓單個核細胞及人臍帶源間充質(zhì)干細胞可以降低腎大部分切除慢性腎損傷大鼠的尿蛋白排泄，減輕血清尿素及肌酐水平，對慢性腎損傷大鼠的腎功能具有保護作用。形態(tài)學觀察提示，骨髓單個核細胞及人臍帶源間充質(zhì)干細胞可以抑制腎小球肥大，減輕足細胞損傷，減輕腎小球硬化面積，減輕腎間