A20基因治療顱腦損傷的研究.pdf

1、目的：顱腦損傷后的神經(jīng)細(xì)胞凋亡是傷后細(xì)胞損失的重要方式之一，如何抑制損傷后的細(xì)胞凋亡從而保留更多的神經(jīng)元以得到更好的神經(jīng)功能預(yù)后一直是科學(xué)家們研究的重點(diǎn)之一A20基因?qū)黉\指蛋白基因家族，可以拮抗TNFR介導(dǎo)的死亡受體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路。本研究擬通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染使得顱腦創(chuàng)傷后的A20基因表達(dá)上調(diào)，從而研究A20基因在創(chuàng)傷性顱腦損傷中的抗凋亡腦保護(hù)作用。 方法：實(shí)驗(yàn)組與對照組各35只SD大鼠，制作重度顱腦損傷模型后實(shí)驗(yàn)組與對照組大鼠分

2、別在傷后30分鐘在立體定向儀下向損傷灶周邊皮質(zhì)及損傷灶內(nèi)多點(diǎn)注射脂質(zhì)體—pcDNA3.1—A20和脂質(zhì)體—pcDNA3.1空質(zhì)粒．兩組動(dòng)物分別于術(shù)后12h、24h、48h、72h、168h各取5只大鼠取腦制作切片，免疫組化法檢測A20基因的表達(dá)和損傷后細(xì)胞凋亡的情況；另每組剩余的10只大鼠于傷后第1、2、3、4周，進(jìn)行斜板試驗(yàn)測試其神經(jīng)功能． 結(jié)果：(1)免疫組化可見損傷后實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物損傷灶周邊A20表達(dá)顯著高于對照組(P＜0.0

3、1)．(2)顱腦損傷后的細(xì)胞凋亡：顱腦損傷后可見損傷側(cè)皮質(zhì)、海馬分布有不同數(shù)量的凋亡細(xì)胞，以損傷灶周圍皮質(zhì)最為集中；兩組的細(xì)胞凋亡均在傷后72h小時(shí)達(dá)到高峰．實(shí)驗(yàn)組大鼠的傷后12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)及72小時(shí)神經(jīng)凋亡數(shù)量較對照組明顯降低(P＜0.01或0.05)。(3)損傷第1、2、3周，實(shí)驗(yàn)組與對照組大鼠的斜板試驗(yàn)臨界角度無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；損傷第4周，實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物臨界角度大于對照組(P＜0.05)． 結(jié)論：對創(chuàng)傷