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1、本文研究工作分為兩部分: 第一部分:目的:研究間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)和全骨髓細(xì)胞治療免疫介導(dǎo)再生障礙性貧血(從)小鼠的療效比較。 方法:建立BALB/C小鼠免疫介導(dǎo)再生障礙性貧血模型,觀察MSCs和全骨髓細(xì)胞對(duì)動(dòng)物模型的療效,包括記錄一般情況變化、血常規(guī)檢查、骨髓切片眥染色,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)治療后小鼠外周血和脾臟的CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞。 結(jié)果:①觀察AA模型小鼠至第20天,對(duì)照組全部死亡(6/6);MSC
2、s組4例死亡(4/8);全骨髓細(xì)胞組1例死亡(1/8)。②MSCs組和全骨髓細(xì)胞組存活小鼠,其體重變化趨勢(shì)、血細(xì)胞計(jì)數(shù)、骨髓造血功能恢復(fù)均無(wú)明顯差異。③檢測(cè)MSCs組和全骨髓細(xì)胞組脾臟CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD4+/CD8+的比值示無(wú)差異,與正常小鼠相比,MSCs組外周血CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞水平有下降趨勢(shì)。全骨髓細(xì)胞組CD8+T細(xì)胞水平明顯下降。 結(jié)論:?jiǎn)为?dú)使用MSCs治療能夠使部分AA小鼠癥狀改善、造血恢復(fù)
3、。MSCs治療有效率不如全骨髓細(xì)胞,但兩組治療有效者一般狀況改善、恢復(fù)造血、T淋巴細(xì)胞亞群分布無(wú)明顯差異。MSCs有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。 第二部分:目的:探討白細(xì)胞介素23(IL-23)在白血病患者中的表達(dá)規(guī)律以及人骨髓來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)對(duì)IL-23和TGF-β 1表達(dá)的影響。 方法:運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR方法,檢測(cè)20例急性髓系白血病患者、10例急性淋巴細(xì)胞白血病患者、10例慢性粒細(xì)胞白血病患者和10例正常對(duì)照中
4、骨髓單個(gè)核細(xì)胞IL-23 p19 mRNA的表達(dá)水平。檢測(cè)20例急性白血病患者(10例AML、10例ALL)骨髓單個(gè)核細(xì)胞原代培養(yǎng)及其與MSCs共培養(yǎng)后IL-23p19、TGF-β 1 mRNA的表達(dá)水平。用ELISA方法檢測(cè)急性白血病患者血漿、骨髓上清,正常對(duì)照血漿中IL.23含量;檢測(cè)骨髓單個(gè)核細(xì)胞原代培養(yǎng)上清中以及與MSCs共培養(yǎng)后上清中IL-23含量。 結(jié)果:急性髓系白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、慢性粒細(xì)胞白血病患者骨髓單
5、個(gè)核細(xì)胞IL-23p19 mRNA的表達(dá)水平與正常對(duì)照相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,三者之間也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);急性白血病患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞與MSCs共培養(yǎng)后IL-23p19 mRNA的表達(dá)水平降低,但尚未達(dá)到有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),TGF-β1 mRNA表達(dá)水平無(wú)明顯差異(P>0.05)。急性白血病患者血漿、骨髓上清IL-23水平與正常對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。骨髓單個(gè)核細(xì)胞和MSCs共培養(yǎng)上清中IL-23水平下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(
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