急性早幼粒白血病細(xì)胞分化過程中維甲酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究.pdf

1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文急性早幼粒白血病細(xì)胞分化過程中維甲酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究姓名：潘曉蓉申請學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：童建華20090501上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博十!學(xué)位論文細(xì)胞分化中受維甲酸調(diào)控的基因網(wǎng)絡(luò)，我們對APL細(xì)胞株NB4在維甲酸作用前后的基因表達(dá)譜進(jìn)行了比較，分離和克隆了一系列受維甲酸誘導(dǎo)的基因，RIGG就是其中之一。在未經(jīng)ATI認(rèn)處理的NB4細(xì)胞中RIGG基因幾乎不表達(dá)，經(jīng)ATRA作用72小時(shí)后其表

2、達(dá)水平明顯上升。進(jìn)一步的功能研究發(fā)現(xiàn)，RIGG可以通過上調(diào)p21和p27的蛋白水平，抑制細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞分化。在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)在沒有STATl蛋白存在的情況下，IRF9和STAT2可以發(fā)生相互作用，形成復(fù)合物，并與RIG—G基因啟動(dòng)子序列中的ISRE元件結(jié)合，誘導(dǎo)RIGG基因的表達(dá)。在NB4細(xì)胞中，由于RIGG并不是ATRA直接的靶基因，ATRA對RIG—G的誘導(dǎo)表達(dá)首先從誘導(dǎo)靶基因IRF1開始，而IRF1又可以進(jìn)一步使細(xì)胞內(nèi)IR

3、F一9和STAT2的蛋白水平上升，IRF9和STAT2形成的復(fù)合物才是激活RIG—G基因表達(dá)必需的、也是最基本的蛋白因子。此外，在這部分的研究中，我們還對一些APL患者骨髓細(xì)胞中的RIGG表達(dá)情況進(jìn)行了檢測，不但發(fā)現(xiàn)ATRA在離體的新鮮APL細(xì)胞中也能上調(diào)ⅪGG的水平，而且發(fā)現(xiàn)RIGG基因表達(dá)水平的高低可能對臨床判斷藥物療效，監(jiān)測疾病進(jìn)程具有一定的輔助參考價(jià)值。在本論文的第二部分中，我們對可能存在的一種新的維甲酸作用方式——非基因效應(yīng)作

4、用機(jī)制進(jìn)行了初步的探討。大量證據(jù)已經(jīng)表明細(xì)胞的分化成熟是細(xì)胞內(nèi)多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相互作用的結(jié)果。有研究顯示，一些能使細(xì)胞內(nèi)cAMP含量升高的藥物，如腺苷酸環(huán)化酶的激動(dòng)劑、磷酸二酯酶的抑制劑等，可大大增強(qiáng)ATRA對APL細(xì)胞分化的誘導(dǎo)效應(yīng)；反之，如果降低cAMP的含量，則會(huì)不同程度地抑制ATRA誘導(dǎo)分化APL細(xì)胞。這些現(xiàn)象說明APL細(xì)胞的分化成熟不但需要維甲酸通過核受體傳遞信號(hào)，也需要cAMP／PKA等胞漿信號(hào)途徑的參與。在研究ATRA的誘