SOCS-1和SOCS-3在過敏性休克中調(diào)控機(jī)制的研究.pdf

1、速發(fā)型過敏反應(yīng)(Itamediate Hypersensitivity)或過敏性休克(Anaphylactic shock)是當(dāng)今國(guó)際醫(yī)學(xué)界共同矚目的研究熱點(diǎn)。很多過敏性疾病如哮喘等，在過去10年中年死亡率翻了一倍。對(duì)于過敏性疾病，由于其病理生理學(xué)機(jī)制不是很清楚，大多數(shù)的過敏性疾病未得到改善。 速發(fā)型過敏反應(yīng)又稱Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)，它是已免疫機(jī)體在再次接受同樣變應(yīng)原刺激時(shí)發(fā)生的反應(yīng)。具有發(fā)生、消退快，反應(yīng)強(qiáng)烈的特點(diǎn)，并具明顯的個(gè)體差異

2、。其范圍可以從局部到全身，嚴(yán)重者可導(dǎo)致休克甚至死亡。對(duì)速發(fā)型過敏反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制，目前的認(rèn)識(shí)為：當(dāng)相同的變應(yīng)原再次侵入機(jī)體時(shí)，與體內(nèi)已形成的IgE抗體特異性結(jié)合，激活肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒，釋放出一系列生物活性介質(zhì)，其中組胺，白三烯，前列腺素等被認(rèn)為作用明顯，引起毛細(xì)血管擴(kuò)張，血管壁通透性增加，平滑肌收縮和腺體分泌增多。發(fā)生速發(fā)型過敏反應(yīng)。 IgE是Ⅰ型超敏反應(yīng)中一種很重要的介質(zhì)，又稱反應(yīng)素或親細(xì)胞抗體。大量學(xué)者的研究表明：

3、速發(fā)型過敏反應(yīng)的機(jī)制和IgE抗體生成的調(diào)節(jié)有密切的關(guān)系。IgE的生成量關(guān)系到致敏個(gè)體是否發(fā)生速發(fā)型過敏反應(yīng)。IgE的生成受以下三個(gè)因素的調(diào)控：遺傳因素、抗原的性質(zhì)、輔助T細(xì)胞和細(xì)胞因子，其中輔助性T細(xì)胞與細(xì)胞因子的作用得到了很多研究者的關(guān)注。1995年以來，相繼發(fā)現(xiàn)一系列抑制細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)途徑的蛋白分子，SOCS(Suppressor of cytokine sigaling，細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)的抑制因子)家族蛋白，就是其中一類可被多種

4、細(xì)胞因子誘導(dǎo)產(chǎn)生，反過來又可對(duì)信號(hào)傳導(dǎo)途徑進(jìn)行抑制調(diào)節(jié)的蛋白分子。作為調(diào)控炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)以其數(shù)量少但作用廣泛的特點(diǎn)吸引了人們的注意，細(xì)胞因子信號(hào)抑制因子(SOCS)就是其中的一員。SOCS家族由SOCS1～SOCS7和CIS八種成員組成，其結(jié)構(gòu)相似，SOCS家族成員的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)含多變的N區(qū)、位于中間的SH2區(qū)和保守的SOCS盒(SOCS box)三個(gè)部分。SH2區(qū)含有SH2結(jié)構(gòu)域，它能與其他信號(hào)蛋白的磷酸化酪氨酸殘

5、基結(jié)合，通過該區(qū)域，不同的SOCS蛋白識(shí)別不同的目標(biāo)，進(jìn)而調(diào)節(jié)多種細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)途徑。正常情況下細(xì)胞內(nèi)SOCS表達(dá)水平極低，但多種細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子和激素可誘導(dǎo)SOCS迅速合成，產(chǎn)生的SOCS反過來又主要通過對(duì)JAK-STAT信號(hào)通路的調(diào)節(jié)抑制細(xì)胞因子及激素的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，形成一個(gè)負(fù)反饋調(diào)節(jié)通路，影響炎性介質(zhì)，甚至影響凋亡的發(fā)生。為了探討SOCS的生理作用，有許多相關(guān)研究被開展，包括細(xì)胞培養(yǎng)模式，基因工程小鼠、各種損傷動(dòng)物模型。這些體內(nèi)及

6、體外實(shí)驗(yàn)證明SOCS-1和SOCS-3是這個(gè)家族中僅有的對(duì)免疫系統(tǒng)有作用的成員，我們認(rèn)為它與過敏性休克的發(fā)生發(fā)展也可能有密切關(guān)系。目前在過敏性休克的研究中，SOCS在過敏性休克的作用報(bào)道甚少。我們通過對(duì)過敏性休克死亡病人的臟器作為研究模型，采用分子生物學(xué)等技術(shù)，通過觀察SOCS1和SOCS3在過敏性休克死亡病人各個(gè)重要臟器中的變化，明確SOCS1和SOCS3與過敏性休克的關(guān)系及意義。弄清SOCS在體內(nèi)的可能的作用機(jī)制，從而為過敏性休克的

7、治療提供新的策略。 目的：通過過敏性休克死亡病人的臟器，觀察過敏性休克病人在過敏原引起的疾病發(fā)展過程中SOCS1和SOCS3在心臟，肺臟，腎臟，肝臟和脾臟中的基因水平和蛋白水平的表達(dá)的變化，并明確其表達(dá)的部位，探討SOCS在體內(nèi)的可能的作用機(jī)制從而為過敏性休克的治療提供新的策略。 方法：收集2006年02月至2006年10月經(jīng)中山大學(xué)法醫(yī)鑒定中心鑒定，尸體解剖及組織學(xué)檢驗(yàn)為符合過敏性休克的病例12例(其中男7例，女5例。

8、年齡3～65歲)。取其肝臟、腎臟、心臟、肺臟和脾臟組織。立即液氮下保存。收集同期15例無病外傷所致的意外死亡者(其中男8例，女7例。年齡12～55歲)同類臟器組織作為正常對(duì)照。取各臟器組織行病理檢查和提取RNA，采用RT—PCR測(cè)各組織中SOCS1和SOCS3的mRNA的相對(duì)含量，用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件測(cè)定它們之間的變化關(guān)系。用免疫組化法觀察SOCS1、SOCS3和IFN-γ、IgE在組織中蛋白的表達(dá)。運(yùn)用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)學(xué)方法比

9、較兩組的積分光密度和陽性細(xì)胞數(shù)值。 SOCS-1和SOCS-3在過敏性休克中調(diào)空機(jī)制的研究結(jié)果：病理切片HE示：過敏性休克組中可見各臟器的廣泛淤血，間質(zhì)血管充血，肺臟可見嗜酸性粒細(xì)胞。腎臟腎小球部分玻璃樣變性或纖維化。腎小管上皮輕度自溶。肝臟部分肝細(xì)胞脂肪變性。SOCS1和SOCS3的蛋白和mRNA在各臟器中表達(dá)均較正常組增高。各臟器中SOCS1表達(dá)水平高于SOCS3(P均<0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的意義。以腎臟表達(dá)最高，且