MiR-155在胃癌中的表達(dá)及相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、目的：研究miR-155在胃癌及相應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)情況,并分析其在胃癌臨床診斷中的意義；研究miR-155在胃癌細(xì)胞中的調(diào)控機(jī)制,初步探討其與腫瘤細(xì)胞分化之間的關(guān)系。
　　 方法：用實(shí)時(shí)定量RT-PCR的方法檢測(cè)83例胃癌患者癌及相應(yīng)癌旁組織中miR-155與其靶基因腫瘤蛋白P53可誘導(dǎo)核蛋白1(TP53INP1)、骨形態(tài)發(fā)生蛋白7(BMP-7)的表達(dá),分析miR-155與TP53INP1及BMP-7之間的關(guān)系；用實(shí)時(shí)定量RT

2、-PCR檢測(cè)胃癌組織中介導(dǎo)上皮細(xì)胞間質(zhì)樣轉(zhuǎn)化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)發(fā)生的轉(zhuǎn)錄因子Slug、Twist、上皮性標(biāo)記基因E-鈣粘附蛋白(E-cadherin)的表達(dá)情況,并分析miR-155與各基因之間的相互關(guān)系。通過(guò)基因轉(zhuǎn)染和RNA干擾正向和負(fù)向調(diào)節(jié)SGC-7901細(xì)胞中miR-155的表達(dá),運(yùn)用Western印跡法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后TP53INP1及BMP-7的蛋白水平的表達(dá)情況,

3、分析miR-155對(duì)TP53INP1和BMP-7的調(diào)控作用。
　　 結(jié)果：胃癌及相應(yīng)的癌旁組織中miR-155的表達(dá)無(wú)顯著差異(P>0.05)。低分化胃癌患者miR-155的表達(dá)明顯高于中高分化者(P<0.05),而miR-155與胃癌組織大小、胃癌分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無(wú)關(guān)(P>0.05)。實(shí)時(shí)定量RT-PCR結(jié)果顯示,胃癌組織中miR-155的表達(dá)與其靶基因TP53INP1呈負(fù)相關(guān)(r=-0.45,P<0.05),并與BMP-

4、7呈負(fù)相關(guān)(r=-0.40,P<0.05)。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示過(guò)表達(dá)miR-155能下調(diào)SGC-7901細(xì)胞中TP53INP1的蛋白表達(dá)水平。胃癌組織中miR-155的表達(dá)與介導(dǎo)EMT發(fā)生的Slug、Twist、E-cadherin的表達(dá)均不相關(guān)(P>0.05),而Slug與Twist的mRNA表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)(r=0.56,P<0.01)。
　　 結(jié)論：MiR-155可能通過(guò)下調(diào)TP53INP1的表達(dá)在胃癌的分化過(guò)程中起重要