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1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文miR155、miR32基因在肺癌中的突變分析姓名:李冠華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):內(nèi)科學(xué)(呼吸系?。┲笇?dǎo)教師:李懷臣20070513山東大學(xué)碩士學(xué)士論文miR一155、miR一32基因在肺癌中的突變分析專業(yè):呼吸內(nèi)科研究生:李冠華導(dǎo)師:李懷臣教授中文摘要目的:通過PCR—SSCP方法檢測(cè)石蠟包埋肺癌組織及石蠟包埋癌旁正常肺組織中miR一155、miR一32基因的突變情況,以期探討其在肺癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制。方法:1
2、20例石蠟包埋肺癌組織和42例石蠟包埋癌旁正常肺組織采用蛋白酶K消化酚一氯仿抽提法提取基因組DNA,應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)一單鏈構(gòu)象多態(tài)性(p01ymerasechainreaction—singlestrandconformationpolymorphsim,PCR—SSCP)檢測(cè)其中miR一155、miR一32基因突變情況。統(tǒng)計(jì)處理均在SPSS13O軟件上進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用x2檢驗(yàn)和秩和相關(guān)分析(Spearman相關(guān)分析)進(jìn)行分析,以尺0
3、05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:(1)DNA提取結(jié)果所有標(biāo)本均成功提取基因組DNA,1%瓊脂糖電泳結(jié)果示石蠟包埋肺組織提取基因組DNA降解較明顯,與全血、新鮮組織中提取基因組DNA電泳圖明顯不同。所有標(biāo)本均在紫外分光光度儀下測(cè)定,確定每一標(biāo)本0D:。。/0D。。。大于175以保證DNA純度,加入適量TE緩沖液調(diào)整DNA濃度使其保持在20~50ng/ul之間。(2)PCR結(jié)果miR一155,miR一32基因在120例肺癌組織和42例癌旁正常肺組
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