RhoA-ROCK途徑在血管外膜炎癥介導(dǎo)的大鼠頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖中的可能機(jī)制.pdf

1、前言：
　　 動(dòng)脈粥樣硬化(athero sclerosis,AS)是嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的心血管內(nèi)科常見(jiàn)病之一。在A(yíng)S發(fā)病機(jī)制中,血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能障礙和損傷被認(rèn)為始動(dòng)因素。但隨著研究的深入,血管外膜作為AS發(fā)生發(fā)展的重要因素日益受到重視。既往研究揭示,外膜不但對(duì)正常血管結(jié)構(gòu)和功能起調(diào)節(jié)作用,AS引起的血管重塑也與外膜有關(guān)。而伴隨著AS的發(fā)生發(fā)展,血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的

2、形態(tài)結(jié)構(gòu)功能也發(fā)生著變化,有研究者發(fā)現(xiàn)血管外膜同樣參與到對(duì)VSMC的調(diào)節(jié)。
　　 RhoA/ROCK信號(hào)系統(tǒng)廣泛分布于哺乳類(lèi)動(dòng)物的組織細(xì)胞中,是具有信息傳導(dǎo)和分子開(kāi)關(guān)功能的信號(hào)多肽。新進(jìn)研究表明,RhoA/ROCK信號(hào)系統(tǒng)在影響VSMC增殖和蛋白表型變化方面也發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn),VSMC可以表達(dá)收縮表型和合成表型兩種結(jié)構(gòu)蛋白,而且當(dāng)生長(zhǎng)環(huán)境改變時(shí)(AS、高血壓、腫瘤等),VSMC可發(fā)生兩蛋白表型間的相互轉(zhuǎn)化。心肌素(Myoc

3、ardin)作為重要的VSMC發(fā)育分化、特異性基因表達(dá)等細(xì)胞進(jìn)程的調(diào)節(jié)因子,在調(diào)控VSMC蛋白表型轉(zhuǎn)化方面也發(fā)揮重要作用。同時(shí),RhoA/ROCK信號(hào)系統(tǒng)和Myocardin在調(diào)節(jié)VSMC的蛋白表型變化方面關(guān)系密切。
　　 目的：
　　 本研究正是采用了硅膠管包裹大鼠頸動(dòng)脈的方法建立血管外膜慢性炎癥性損傷介導(dǎo)的AS模型,觀(guān)察大鼠頸動(dòng)脈VSMC形態(tài)結(jié)構(gòu)和蛋白表型的變化,探討RhoA/ROCK信號(hào)途徑在該模型中是否發(fā)揮對(duì)VS

4、MC增殖和蛋白表達(dá)的調(diào)控作用,及可能的機(jī)制和意義。
　　 方法：
　　 Wistar大鼠12只,按隨機(jī)數(shù)字表法均分為模型組和對(duì)照組,其中模型組用硅膠管包裹大鼠頸動(dòng)脈1周造成血管外膜的慢性炎癥性損傷,取材后做標(biāo)本H-E染色分別觀(guān)察兩組血管形態(tài)學(xué)變化,用RT-PCR和Westernblot檢測(cè)血管組織中SMα-actin、Myocardin、RhoA,ROCK2的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 與對(duì)照組相比,模型

5、組大鼠頸動(dòng)脈血管外膜增厚,炎性細(xì)胞浸潤(rùn),中膜平滑肌細(xì)胞(smooth muscle cell,SMC)增生,排列紊亂;模型組大鼠頸動(dòng)脈中SMα-actin的mRNA水平和蛋白表達(dá)水平較對(duì)照組均增高;Myocardin的mRNA水平低于對(duì)照組,而Myocardin的蛋白表達(dá)水平較對(duì)照組無(wú)明顯差異;RhoA的mRNA水平和蛋白表達(dá)水平均高于對(duì)照組;ROCK2的mRNA水平和蛋白表達(dá)水平較對(duì)照組均明顯增高。
　　 結(jié)論：
　　

6、 1、用硅膠管包裹大鼠頸動(dòng)脈1周造成血管外膜的慢性損傷(模型組)后,出現(xiàn)類(lèi)似于A(yíng)S樣的血管形態(tài)學(xué)變化,表現(xiàn)為大鼠頸動(dòng)脈VSMC大量增生增殖。
　　 2、模型組大鼠頸動(dòng)脈表現(xiàn)為以收縮能力較強(qiáng)的蛋白標(biāo)志物表達(dá)(SMα-actin表達(dá)水平明顯增高)為主的VSMC分化狀態(tài)。進(jìn)一步證實(shí)了包管1周的模型組大鼠頸動(dòng)脈收縮性增強(qiáng)。以上結(jié)果有可能與RhoA/ROCK信號(hào)途徑(模型組RhoA、ROCK2表達(dá)水平明顯增高)的激活有關(guān)。