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1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文丹參、腦神經(jīng)生長素聯(lián)合應(yīng)用對順鉑耳毒性的防護作用姓名:楊逸申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師:路虹2003.3.1中文摘要切片,染色,透射電鏡觀察。免疫組織化學(xué)測定iNOS的表達:快速處死動物,暴露耳蝸,蝸頂鉆孔,4%多聚甲醛(4℃,PH=74)耳蝸灌注,繼續(xù)固定1周以上。10%EDTA脫鈣2—3周,漂洗后梯度酒精脫水,浸蠟,定向包埋,常規(guī)石蠟切片。石蠟切片脫蠟水洗,01%胰蛋白酶消化,37。C,203
2、0min,PBS沖洗,用5%正常山羊血清封閉,加入兔抗鼠抗體40過夜。PBS沖洗,再加入生物素化抗兔抗體孵育60min,再用HRD標記的卵自素孵育120min,顯色,復(fù)染、梯度酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固,光鏡觀察。利用圖像分析軟件,測定各組iNOS陽性反應(yīng)物的平均灰度值,以(X_s)表示,灰度值越大,說明組化反應(yīng)程度越低。結(jié)果:ABR聽閾檢測:順鉑組聽力下降顯著,閾值升高。丹參組和腦神經(jīng)生長素組兩個單獨用藥組閾值也有升高,但較順
3、鉑組為低(p,001);聯(lián)合用藥組的聽力損失比較輕,閩值和單獨用藥組比較也有差異性CPO05,P001)。從聽功能檢查上可以看出丹參、腦神經(jīng)生長素對順鉑引起的聽力閾移有拮抗作用,兩藥聯(lián)合應(yīng)用有一定協(xié)同作用。掃描電鏡,透射電鏡毛細胞和螺旋神經(jīng)節(jié)超微結(jié)構(gòu)觀察:順鉑組毛細胞的損傷嚴重,大片纖毛倒伏,粘連,缺失,底回重于頂回,外毛細胞重于內(nèi)毛細胞。毛細胞和螺旋神經(jīng)節(jié)細胞的細胞器也損傷嚴重,毛細胞核膜皺縮,線粒體腫脹,大量空泡樣變;螺旋神經(jīng)節(jié)細胞
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