F-2毒素對(duì)體外培養(yǎng)豬卵巢顆粒細(xì)胞的毒害及VE的控毒研究.pdf

1、F-2毒素是一種由三線鐮刀菌等真菌產(chǎn)生的霉菌毒素。它的雌激素樣作用能誘發(fā)機(jī)體的雌激素過多癥和生殖道的生理變異，導(dǎo)致動(dòng)物的生殖發(fā)育毒性和免疫毒性，同時(shí)，F(xiàn)-2毒素能降低畜禽產(chǎn)品的品質(zhì)，對(duì)人類健康存在潛在的威脅。為此我們開展了此項(xiàng)研究。 研究目的：探討F-2毒素對(duì)體外培養(yǎng)的豬卵巢顆粒細(xì)胞的毒性損傷作用，并應(yīng)用維生素E作為一種控毒劑，來闡明對(duì)F-2毒素的控毒機(jī)制。為有效控制F-2毒素的體內(nèi)毒性及研制有效的控毒制劑提供科學(xué)的理論依據(jù)。

2、 研究方法：以豬卵巢顆粒細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，采用一次性注射器吸取獲得卵巢顆粒細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)；用噻唑蘭(MTT)法檢測(cè)濃度分別為80μg/ml、20μg/ml、5μg/ml、1.25μg/ml的F-2毒素對(duì)豬卵巢顆粒細(xì)胞的殺傷作用，同時(shí)檢測(cè)在上述各F-2毒素組中加入50mg/mlVE的各控毒組細(xì)胞活力；用單細(xì)胞凝膠電泳檢測(cè)判定毒素組細(xì)胞是否產(chǎn)生了DNA斷裂和控毒組VE對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用；用黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)不同劑量F-2毒素組和添加了V

3、E的控毒組對(duì)卵巢顆粒細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)的SOD活性的影響；用硫代巴比妥酸法測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)的MDA含量；用DNALadder梯狀帶以判定卵巢顆粒細(xì)胞是否發(fā)生凋亡。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：采用一次性注射器吸取獲得卵巢顆粒細(xì)胞，其活率在85～95﹪之間；5μg/ml、20μg/ml、80μg/ml的F-2毒素對(duì)卵巢顆粒細(xì)胞的生長具有抑制作用，并有時(shí)間和劑量依賴性；80μg/ml、20μg/ml的F-2毒素能夠使細(xì)胞DNA嚴(yán)重受損，拖尾

4、率分別達(dá)到82.67﹪和80.33﹪，VE能夠控制F-2毒素對(duì)細(xì)胞毒害；各毒素組細(xì)胞培養(yǎng)液中的SOD活性都明顯下降，MDA含量顯著升高；在控毒組中，80μg/mlF-2毒素+50mg/mlVE的控毒組SOD活性下降，MDA含量升高，其他控毒組SOD活性正常，MDA含量稍有升高；在實(shí)驗(yàn)中沒有檢測(cè)到DNALadder梯狀帶。 結(jié)論：F-2毒素能抑制體外培養(yǎng)的豬卵巢顆粒細(xì)胞的增殖，并能損傷細(xì)胞DNA，導(dǎo)致細(xì)胞膜多不飽和脂肪酸脂質(zhì)過氧化