復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒的制劑工藝及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、第一部分：復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒制劑工藝研究 復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒處方為治療骨質(zhì)疏松癥的臨床經(jīng)驗(yàn)方，由補(bǔ)骨脂、核桃仁、知母、黃柏、砂仁、薏苡仁、懷牛膝、延胡索八味藥材組成。為了將該藥物更好的應(yīng)用于臨床并便于儲(chǔ)運(yùn)及服用，參照中藥研究的指導(dǎo)原則，研究了該藥的制備工藝。 目的：通過設(shè)計(jì)工藝路線，進(jìn)行工藝方法和條件的篩選，制定出方法簡便，條件確定的穩(wěn)定工藝，以優(yōu)選復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒的最佳提取工藝與制備方法。 方法：采用正交試驗(yàn)篩選提取工藝

2、。以加水量(A)、浸泡時(shí)間(B)、提取時(shí)間(C)作為考察因素，以揮發(fā)油收率為考察指標(biāo)，優(yōu)選核桃仁、砂仁、薏苡仁中的揮發(fā)油提取工藝。以醇濃度(A)、醇用量(B)、提取時(shí)間(C)和提取次數(shù)(D)為考察因素，以補(bǔ)骨脂素的含量為考察指標(biāo)篩選補(bǔ)骨脂、知母、黃柏、懷牛膝及延胡索乙醇提取工藝。 結(jié)果：通過正交試驗(yàn)篩選的最佳制備工藝條件為：(1)揮發(fā)油的提?。汉颂胰?、砂仁、薏苡仁加10倍量水，浸泡1小時(shí)，提取8小時(shí)。(2)補(bǔ)骨脂、知母、黃柏、懷

3、牛膝及延胡索醇提結(jié)果：根據(jù)實(shí)驗(yàn)所得最佳的因素組合應(yīng)為A<,3>B<,3>C<,3>D<,2>，即80％乙醇，溶媒用8倍量，回流時(shí)間為2h，提取次數(shù)為2次。(3)將提取揮發(fā)油后的水溶液及醇提溶液分別減壓濃縮制得稠膏，混勻、加糊精適量，制成顆粒，干燥，放冷，噴入揮發(fā)油，混勻，即得。 結(jié)論：通過正交試驗(yàn)優(yōu)選出最佳的復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒最佳制備工藝，該制備工藝穩(wěn)定。制備工藝藥品的質(zhì)量關(guān)系到人民的健康，也關(guān)系到藥品本身的生存與發(fā)展。專屬性強(qiáng)、簡

4、便且行之有效的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)是保證藥品質(zhì)量的依據(jù)，因此，確定復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒的薄層鑒別和含量測(cè)定方法將為復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒的質(zhì)量控制提供分析方法和理論依據(jù)，具有重要意義。 第二部分：復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究 目的：利用薄層色譜法對(duì)復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒處方中補(bǔ)骨脂、黃柏、延胡索三味中藥進(jìn)行定性鑒別。并建立了復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒中補(bǔ)骨脂素的高效液相色譜含量測(cè)定方法。 方法：(1)鑒別方法的研究：采用薄層色譜法，選用合適的提取溶劑和方法，以

5、及最適宜的固定相、展開系統(tǒng)、顯色系統(tǒng)等，對(duì)復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒中部分藥材進(jìn)行鑒別。(2)補(bǔ)骨脂素的含量測(cè)定：①提取：復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒加入一定量的甲醇超聲提取一定時(shí)間后，補(bǔ)足減失的溶劑，過濾，取續(xù)濾液稀釋到一定濃度，即得。②色譜條件：選擇合適的固定相，調(diào)整流動(dòng)相的組成、配比、流速以使補(bǔ)骨脂素峰與其它峰完全分離。③系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：在已確定的色譜條件下，考察補(bǔ)骨脂素峰的分離度、理論板數(shù)、對(duì)稱度。④標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：配制系列濃度的補(bǔ)骨脂素對(duì)照品溶液，分別

6、進(jìn)樣測(cè)定峰面積，以補(bǔ)骨脂素對(duì)照品溶液濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)分別繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。⑤最低檢測(cè)限試驗(yàn)：逐步稀釋補(bǔ)骨脂素對(duì)照品溶液，進(jìn)樣，直至補(bǔ)骨脂素色譜峰的峰高為噪聲三倍。⑥穩(wěn)定性試驗(yàn)：取供試品溶液分別放置0，2，4，6，8，24h后，按已確定的色譜條件測(cè)定峰面積。⑦精密度試驗(yàn)：取復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒，制備供試品溶液，按已確定的色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。⑧重現(xiàn)性試驗(yàn)：取同一復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒細(xì)粉5份，制備供試品溶液后，測(cè)定補(bǔ)骨脂素的含

7、量。⑨回收率試驗(yàn)：依次取復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒細(xì)粉適量，分別加入補(bǔ)骨脂素對(duì)照品溶液，測(cè)定補(bǔ)骨脂素的含量。⑩樣品含量測(cè)定：分別取10個(gè)不同批次的復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒制備供試品溶液，進(jìn)樣，按外標(biāo)法計(jì)算補(bǔ)骨脂素的含量。 結(jié)果：(1)鑒別方法的研究補(bǔ)骨脂、黃柏、延胡索采用相應(yīng)的薄層鑒別方法，薄層展開后均顯示與對(duì)照品相同的特異性斑點(diǎn)，分離效果好，列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。(2)補(bǔ)骨脂素的含量測(cè)定：①提?。撼暡ㄕ袷幪崛?0min，復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒中補(bǔ)骨脂素可被完全

8、提取。②最佳色譜條件：以十八烷基鍵合硅膠為固定相，以甲醇.水溶液(54：45)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長為245nm，流速為1.0ml·min<'-1>，進(jìn)樣量為2μL。③系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：在上述色譜條件下，補(bǔ)骨脂素峰形良好，無雜質(zhì)峰干擾，其理論塔板數(shù)以補(bǔ)骨脂素計(jì)不低于3000，保留時(shí)間為11.7min左右，與相鄰色譜峰的分離度均大于1.5。④標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：補(bǔ)骨脂素濃度在4.2～21.0μg·ml<'-1>范圍內(nèi)與峰面積有良好的

9、線性關(guān)系，回歸方程為Y=5.21×10<'5>X-1.07×10<'5>，r=0.9997(n=5)，⑤最低檢測(cè)限：為5.23ng。⑥樣品穩(wěn)定性試驗(yàn)：樣品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。⑦樣品精密度試驗(yàn)：重復(fù)進(jìn)樣6次后，峰面積的RSD為0.93％。⑧樣品重現(xiàn)性試驗(yàn)：補(bǔ)骨脂素含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.24％，重現(xiàn)良好。⑨回收率試驗(yàn)：樣品的平均回收率為98.29％，RSD為0.59％。⑩含量測(cè)定結(jié)果：復(fù)方補(bǔ)骨脂顆粒中含補(bǔ)骨脂的量以補(bǔ)骨脂素計(jì)，每袋不得少于