皮膚組織工程中骨髓間充質干細胞作為種子細胞的可行性研究.pdf

1、皮膚移植是治療大面積燒傷或創(chuàng)傷后皮膚缺損的主要手段。其中自體皮移植是臨床最為有效的方法，但受到自體皮源不足的限制。隨著組織工程的興起，人們意識到開發(fā)出能有效促進創(chuàng)面愈合與皮膚組織再生的新型皮膚再生產(chǎn)品具有重要意義。組織工程三大要素是種子細胞，支架材料及合適的微環(huán)境。種子細胞一直是組織工程研究的關鍵要素。理想的種子細胞應該具有以下的特點：來源方便；在體外增殖迅速可以短期擴增到所需的數(shù)量；長期體外傳代不改變生物學特性等。骨髓間充質干細胞是成

2、體干細胞的一種，具有自我更新能力和多向分化潛能。在特定的條件下可以成骨細胞，成軟骨細胞及成脂肪細胞分化。骨髓間充質干細胞的獲取不受倫理學的限制，且取材方便，免疫排斥反應小，增殖能力強，是一種理想的種子細胞。 骨髓間充質干細胞能否向表皮細胞分化?能否作為構建組織皮膚工程的種子細胞?我們的試驗基于這一思路展開。我們之前的研究結果表明骨髓間充質干細胞有很大可能分化為表皮細胞。于是我們從重復體外誘導分化，到動物創(chuàng)面愈合中再上皮化的表皮細

3、胞中有無人源的骨髓間充質干細胞，再到體外用不對稱支架構建看骨髓間充質干細胞能否形成表皮層或協(xié)同表皮細胞形成表皮。我們進行了大量的試驗，但總的結果顯示骨髓間充質干細胞盡管能促進創(chuàng)面的愈合，但分化為表皮細胞的確有難度。最后我們又從大面積燒傷病人著手，探討在應激反應中，機體能否動員人的骨髓間充質干細胞到血液中而參與燒傷創(chuàng)面的修復，及今后血源性間充質干細胞有無可能作為表皮的種子細胞?結果顯示可能性存在，但分離純化的方法上還需努力。本實驗的主要結

4、果及推論如下： 1．采用Percoll密度梯度離心結合貼壁篩選分離并培養(yǎng)擴增成人骨髓間充質干細胞，所得骨髓間充質干細胞呈典型的成纖維細胞形態(tài)，漩渦狀生長；具有骨髓間充質干細胞的表面標志物。 2．人骨髓間充質干細胞在特殊誘導液的作用下具有向表皮細胞分化的可能性。 3．人骨髓間充質干細胞和體外定向誘導分化后的骨髓間充質干細胞對裸鼠的皮膚創(chuàng)面都有促進愈合作用，但在特殊誘導液作用下的骨髓間充質干細胞并沒有表現(xiàn)出表皮細胞的