瘧原蟲源巨噬細(xì)胞遷移抑制因子的分泌途徑及其對宿主細(xì)胞基因表達(dá)影響的初步研究.pdf

1、瘧疾是世界上最嚴(yán)重的傳染性疾病之一，由于抗藥蟲株的出現(xiàn)以及尚無有效的疫苗，目前瘧疾的防治仍然面臨巨大挑戰(zhàn)。迄今為止，瘧疾病理機(jī)制、瘧原蟲逃逸宿主免疫攻擊機(jī)制等方面仍有大量疑問尚未解決，這主要是由于目前人們對瘧原蟲生物學(xué)的認(rèn)識還十分有限所致。本實驗室前期分別鑒定了兩種來源于瘧原蟲的巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor，MIF)：惡性瘧原蟲PfMIF(Plasmodium fal

2、ciparum MIF)和約氏瘧原蟲PyMIF(Plasmodium yoelii MIF)，并且證明瘧原蟲MIF分子具有MIF家族的典型結(jié)構(gòu)特征和生物學(xué)活性，并建立了特異檢測技術(shù)。本論文工作在此基礎(chǔ)上，對瘧原蟲MIF分子的分泌途徑和其參與的信號通路以及誘導(dǎo)的免疫效應(yīng)等方面進(jìn)行了初步探討。 實驗結(jié)果顯示，在轉(zhuǎn)染的哺乳動物細(xì)胞系中PfMIF分子的分泌僅被抑制劑Glyburide顯著抑制，提示PfMIF的分泌通過非經(jīng)典分泌途徑ABC

3、轉(zhuǎn)運家族成員ABCA1實現(xiàn)，與高等動物MIF分子的分泌途徑一致。在體外培養(yǎng)的惡性瘧原蟲感染紅細(xì)胞中，Methylamine顯著抑制PfMIF分泌，而Glyburide沒有明顯效應(yīng)，提示在感染紅細(xì)胞中PfMIF的分泌可能是通過內(nèi)吞小泡系統(tǒng)實現(xiàn)。另外，應(yīng)用三種以real-time PCR技術(shù)為基礎(chǔ)的第二代芯片，證實PyMIF和宿主小鼠MuMIF能夠調(diào)節(jié)多種免疫效應(yīng)分子和信號通路分子的轉(zhuǎn)錄，其中PyMIF對多種趨化因子及其受體基因、癌基因、凋