辛伐他汀對(duì)支架植入后血管平滑肌增殖的影響及可能的分子機(jī)理.pdf

1、背景：經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療(percutaneouscoronaryinterventionPCI)是治療冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(冠心病)非常重要的技術(shù)手段，以獲效迅速、療效確切、創(chuàng)傷小、恢復(fù)快等特點(diǎn)被廣大患者和心血管醫(yī)生所接受。但是術(shù)后再狹窄的發(fā)生影響了PCI的遠(yuǎn)期療效，也是該技術(shù)的主要限制。早期經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈球囊成型術(shù)(percutaneoustransluminalcoronaryangioplastyPTCA)術(shù)后再狹窄的發(fā)

2、生率為30％～50％。1994年冠脈支架的應(yīng)用使再狹窄的發(fā)生率被明顯的下降了30％～50％，但是支架再狹窄(in-stentrestenosisISR)仍然成為此項(xiàng)治療方法的限制。PTCA后再狹窄發(fā)生75％由于血管重塑，25％因?yàn)橹心て交〖?xì)胞(smoothmusclecellSMC)增生移動(dòng)到新生內(nèi)膜所致。然而，ISR100％是由于SMC增生所致。近幾年來(lái)雷帕霉素和酯杉醇藥物包被支架的出現(xiàn)，使支架再狹窄發(fā)生率降至10％以下。但支架再狹

3、窄的問(wèn)題依然很突出。他汀是一種強(qiáng)有力的降低低密度脂蛋白的藥物，被廣泛用于臨床冠心病的一級(jí)和二級(jí)預(yù)防，但是目前發(fā)現(xiàn)他汀類藥物的調(diào)脂作用不能完全解釋其臨床作用，具有許多不依賴于其降膽固醇作用的多向性效應(yīng)，其抑制SMC增殖和移動(dòng)的作用受到高度重視。 目的：本研究旨在為了探討ISR的發(fā)生機(jī)制，用兔高脂飲食和內(nèi)皮剝脫術(shù)制備動(dòng)脈粥樣硬化狹窄模型，在狹窄部位置入支架，誘導(dǎo)新生內(nèi)膜形成。觀察支架植入后，平滑肌增殖變化，并用辛伐他汀進(jìn)行干預(yù)，觀察

4、辛伐他汀對(duì)兔的腹主動(dòng)脈血管支架植入后血管平滑肌增殖影響、組織形態(tài)學(xué)變化和VSMC的α-平滑肌肌動(dòng)蛋白表達(dá)量、P27kipl蛋白、增殖細(xì)胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen，PCNA)表達(dá)量的變化，探討辛伐他汀對(duì)支架植入后血管新生內(nèi)膜增生的影響和可能機(jī)理。 方法：45只健康的新西蘭雄性大白兔隨機(jī)分為三組，正常組(n=15)，給予正常飲食；對(duì)照組(n=15)和實(shí)驗(yàn)組(n=15)，采用含1.5％膽固

5、醇的高脂飲食加腹主動(dòng)脈內(nèi)皮剝脫術(shù)，并在術(shù)后笫10周分別進(jìn)行腹主動(dòng)脈超聲檢查和血管造影檢查，測(cè)量其血管狹窄程度，一旦證實(shí)：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的腹主動(dòng)脈有明顯動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成，且狹窄程度≥50％，實(shí)驗(yàn)組開(kāi)始服用辛伐他汀5mg/d，服藥至第12天，隨后實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均開(kāi)始服用阿司匹林25mg/d，氯吡格雷12.5mg/d，3天后，行支架植入術(shù)。術(shù)后實(shí)驗(yàn)組開(kāi)始服用辛伐他汀5mg/d，服藥至第30天.30天后處死所有動(dòng)物，取腹主動(dòng)脈含支架段血管，將各組

6、目標(biāo)血管橫行切斷分為三部分。一部分采用塑料包埋進(jìn)行血管組織形態(tài)學(xué)變化的觀察；一部分采用常規(guī)石蠟包埋進(jìn)行免疫組化分析，分別檢測(cè)p27kip1蛋白、PCNA在各組的表達(dá)量的變化；一部分用全層血管提取蛋白，電泳，做Westernblot分析，檢測(cè)收縮型SMC分化標(biāo)志物α-平滑肌肌動(dòng)蛋白在正常組、對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組表達(dá)的含量變化。 結(jié)論：(1)用高脂飲食加動(dòng)脈內(nèi)皮剝脫術(shù)可以很好地建立動(dòng)脈粥樣硬化狹窄模型。(2)用彩色多普勒超聲測(cè)量動(dòng)脈狹窄是

7、完全可行的，與血管造影這個(gè)金標(biāo)準(zhǔn)相比，測(cè)量結(jié)果具一致性。(3)Westernblot結(jié)果說(shuō)明①支架置入導(dǎo)致SMC的分化標(biāo)志物α-平滑肌肌動(dòng)蛋白表達(dá)的含量下降，可能因?yàn)橹Ъ苤萌雽?dǎo)致血管壁損傷后，導(dǎo)致SMC發(fā)生表型轉(zhuǎn)換，由收縮型轉(zhuǎn)變成合成型，在中膜增生移動(dòng)到內(nèi)膜，使收縮型SMC的數(shù)量下降，所以分化標(biāo)志物α-平滑肌肌動(dòng)蛋白隨之下降。②在辛伐他汀的作用下進(jìn)一步下降，可能因?yàn)樵谥Ъ軗p傷的作用下，SMC處于增生狀態(tài)。辛伐他汀在抑制SMC由收縮型向合

8、成型轉(zhuǎn)變的同時(shí)誘導(dǎo)內(nèi)中膜SMC的凋亡。凈結(jié)果是收縮型SMC的數(shù)量減少了，導(dǎo)致SMC的分化標(biāo)志物α-平滑肌肌動(dòng)蛋白表達(dá)的含量下降。這個(gè)結(jié)果表明辛伐他汀對(duì)SMC的干預(yù)作用，，可能涉及兩種機(jī)理：①促進(jìn)或誘導(dǎo)SMC的凋亡；②減少收縮型SMC向合成型SMC轉(zhuǎn)化。(4)服用辛伐他汀的實(shí)驗(yàn)組兔腹主動(dòng)脈支架段內(nèi)的血管新生內(nèi)膜中的VSMC的胞核P27kipl蛋白表達(dá)量明顯升高，VSMC的胞核PCNA表達(dá)量明顯降低，提示辛伐他汀通過(guò)某些蛋白表達(dá)影響細(xì)胞增殖