2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   1.建立間接包被ELISA(enzyme linked immunosorbent assy,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))檢測(cè)血清游離β-HCG(free-β-huaman chorionic gonadotropin,F(xiàn)-β-HCG)檢測(cè)方法。
   2.探討降低ELISA試驗(yàn)中非特異反應(yīng)的方法。
   3.評(píng)估游離β-HCG檢測(cè)在相關(guān)疾病診療中的意義。
   方法:
   1.間接包被EL

2、ISA法檢測(cè)血清游離β-HCG方法學(xué)建立(1)BBC酶標(biāo)反應(yīng)板的制備,(2)抗游離β-HCG單克隆抗體(monoclonal antibody,mAb)的生物素化,(3)辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)過碘酸鈉法標(biāo)記抗游離β-HCG多克隆抗體(polyclonal antibody,pAb),(4)間接包被ELISA法檢測(cè)血清游離β-HCG方法學(xué)建立及評(píng)價(jià)。
   2.降低ELISA中非特異

3、顯色方法學(xué)探討(1)更換標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,(2)用連接有包被抗體的親和層析柱提純酶標(biāo)抗體,(3)在酶標(biāo)抗體中加入包被抗體的Fc段3.血清游離β-HCG與相關(guān)疾病的臨床研究(1)血清游離β-HCG檢測(cè)對(duì)正常妊娠與異位妊娠的診斷意義,(2)血清游離β-HCG檢測(cè)在妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病中的臨床意義。
   結(jié)果:
   1.間接包被ELISA法檢測(cè)血清游離β-HCG方法學(xué)建立:通過對(duì)該方法中各種反應(yīng)條件的優(yōu)化,確定了最適工作條件:生物

4、素抗體和酶標(biāo)抗體的最適工作濃度分別為1:1000和1:12000,本檢測(cè)方法具有較好的穩(wěn)定性,靈敏度0.1ng/ml,回收率95.92%~102.51%,批內(nèi)差異7.54%~11.12%,批間差異12.51%~18.11%,與FSH、TSH、LH、α-HCG的交叉反應(yīng)率<0.1%,檢測(cè)范圍0.1~500ng/ml,與進(jìn)口試劑盒的相關(guān)性尚可(r2=0.7892)。
   2.降低ELISA中非特異顯色方法學(xué)探討:結(jié)果顯示,更換標(biāo)準(zhǔn)

5、品稀釋液和用連接有包被抗體的親和層析柱提純酶標(biāo)抗體兩種方式對(duì)本方法不適用,而向酶標(biāo)抗體中加入包被抗體的Fc段在本實(shí)驗(yàn)中效果顯著。
   3.血清游離β-HCG與相關(guān)疾病的臨床研究:正常妊娠孕婦血清游離β-HCG水平明顯高于異位妊娠患者(p<0.05),妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病患者血清游離β-HCG水平明顯高于正常妊娠孕婦(p<0.05)。
   結(jié)論:
   1.本文研制的間接包被檢測(cè)血清游離β-HCG方法,引入了生物素

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