亞硒酸鈉對超氧陰離子誘導血管平滑肌細胞向成骨細胞分化作用的影響及機理.pdf

1、心血管疾病包括動脈粥樣硬化，冠狀動脈疾病等，是人類健康的重要危險因素。
　　 血管鈣化是心血管疾病的共同病理特征，血管平滑肌細胞向成骨細胞分化是血管鈣化的細胞學基礎(chǔ)。血管鈣化是一個類似于骨形成的、主動的和復雜的過程。研究表明微量元素硒的攝入量與癌癥的發(fā)生率和死亡率呈現(xiàn)負相關(guān)性，提示硒有抗癌作用，而硒對心血管疾病的作用及其可能的機制尚不清楚。硒有清除自由基的作用。外源性的過氧化氫和超氧陰離子促進血管鈣化。
　　 本文采用文

2、獻方法獲取血管平滑肌細胞的體外鈣化模型，通過黃嘌呤/黃嘌呤氧化酶體系產(chǎn)生超氧陰離子，研究亞硒酸鈉是否抑制超氧陰離子誘導的血管平滑肌細胞向成骨細胞的分化以及可能的機制。
　　 ⒈MTT 法檢測不同濃度的黃嘌呤（X）/黃嘌呤氧化酶(XO)體系對細胞活力的影響，檢測超氧陰離子對血管平滑肌細胞向成骨細胞分化的標記蛋白堿性磷酸酶的活性的影響，原子吸收光譜測定細胞的基質(zhì)鈣沉積量。結(jié)果顯示：低濃度的超氧陰離子對細胞活力，ALP 活性和基質(zhì)鈣沉

3、積量無顯著影響；中濃度的超氧陰離子對細胞活力影響不顯著，但抑制ALP 活性和基質(zhì)鈣沉積；高濃度的超氧陰離子對細胞活力影響較大，對細胞毒性大，促進了ALP 活性和基質(zhì)鈣沉積。
　　 ⒉鈣化的VSMCs 加入亞硒酸鈉預處理24h，MAPKK 抑制劑PD98059 預處理2h，X(μmol/L）/XO(Mu/ml)(即濃度為100/40和100/80)作用一定時間后，MTT 法檢測細胞活力和檢測細胞ALP 活性，研究亞硒酸鈉是否對超氧

4、陰離子誘導的血管平滑肌細胞向成骨細胞的分化有抑制作用。結(jié)果表明：加X/XO 作用3天時，亞硒酸鈉對黃嘌呤/黃嘌呤氧化酶體系引起的細胞毒性有顯著的抑制作用，而作用7天時，亞硒酸鈉的抑制作用不明顯；亞硒酸鈉對超氧陰離子誘導的ALP 活性的影響有一定的抑制作用。
　　 ⒊研究亞硒酸鈉抑制超氧陰離子誘導的VSMCs 向成骨細胞分化的可能涉及的機理。檢測細胞谷胱甘肽過氧化酶的活性和觀察胞內(nèi)活性氧物種（ROS）水平，Westernblott

5、ing分析磷酸化的ERK 水平，研究亞硒酸鈉和超氧陰離子對MAPK 信號轉(zhuǎn)導途徑中磷酸化的ERK的活性的影響。結(jié)果表明：超氧陰離子降低了細胞的GPx的活性，而加入亞硒酸鈉，可增加細胞的GPx的活性，表明亞硒酸鈉通過上調(diào)GPx 活性有抑制細胞氧化損傷的作用；與對照組相比較，X/XO組和亞硒酸鈉預處理的X/XO組的胞內(nèi)ROS 水平有一定程度的增加，但亞硒酸鈉作用不顯著；亞硒酸鈉對超氧陰離子激活的磷酸化的ERK 水平有抑制作用，加入MAPKK