亞硒酸鈉對超氧陰離子誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化作用的影響及機理.pdf

1、心血管疾病包括動脈粥樣硬化，冠狀動脈疾病等，是人類健康的重要危險因素。
　　 血管鈣化是心血管疾病的共同病理特征，血管平滑肌細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化是血管鈣化的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。血管鈣化是一個類似于骨形成的、主動的和復(fù)雜的過程。研究表明微量元素硒的攝入量與癌癥的發(fā)生率和死亡率呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)性，提示硒有抗癌作用，而硒對心血管疾病的作用及其可能的機制尚不清楚。硒有清除自由基的作用。外源性的過氧化氫和超氧陰離子促進(jìn)血管鈣化。
　　 本文采用文

2、獻(xiàn)方法獲取血管平滑肌細(xì)胞的體外鈣化模型，通過黃嘌呤/黃嘌呤氧化酶體系產(chǎn)生超氧陰離子，研究亞硒酸鈉是否抑制超氧陰離子誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞向成骨細(xì)胞的分化以及可能的機制。
　　 ⒈MTT 法檢測不同濃度的黃嘌呤（X）/黃嘌呤氧化酶(XO)體系對細(xì)胞活力的影響，檢測超氧陰離子對血管平滑肌細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的標(biāo)記蛋白堿性磷酸酶的活性的影響，原子吸收光譜測定細(xì)胞的基質(zhì)鈣沉積量。結(jié)果顯示：低濃度的超氧陰離子對細(xì)胞活力，ALP 活性和基質(zhì)鈣沉

3、積量無顯著影響；中濃度的超氧陰離子對細(xì)胞活力影響不顯著，但抑制ALP 活性和基質(zhì)鈣沉積；高濃度的超氧陰離子對細(xì)胞活力影響較大，對細(xì)胞毒性大，促進(jìn)了ALP 活性和基質(zhì)鈣沉積。
　　 ⒉鈣化的VSMCs 加入亞硒酸鈉預(yù)處理24h，MAPKK 抑制劑PD98059 預(yù)處理2h，X(μmol/L）/XO(Mu/ml)(即濃度為100/40和100/80)作用一定時間后，MTT 法檢測細(xì)胞活力和檢測細(xì)胞ALP 活性，研究亞硒酸鈉是否對超氧

4、陰離子誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞向成骨細(xì)胞的分化有抑制作用。結(jié)果表明：加X/XO 作用3天時，亞硒酸鈉對黃嘌呤/黃嘌呤氧化酶體系引起的細(xì)胞毒性有顯著的抑制作用，而作用7天時，亞硒酸鈉的抑制作用不明顯；亞硒酸鈉對超氧陰離子誘導(dǎo)的ALP 活性的影響有一定的抑制作用。
　　 ⒊研究亞硒酸鈉抑制超氧陰離子誘導(dǎo)的VSMCs 向成骨細(xì)胞分化的可能涉及的機理。檢測細(xì)胞谷胱甘肽過氧化酶的活性和觀察胞內(nèi)活性氧物種（ROS）水平，Westernblott

5、ing分析磷酸化的ERK 水平，研究亞硒酸鈉和超氧陰離子對MAPK 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中磷酸化的ERK的活性的影響。結(jié)果表明：超氧陰離子降低了細(xì)胞的GPx的活性，而加入亞硒酸鈉，可增加細(xì)胞的GPx的活性，表明亞硒酸鈉通過上調(diào)GPx 活性有抑制細(xì)胞氧化損傷的作用；與對照組相比較，X/XO組和亞硒酸鈉預(yù)處理的X/XO組的胞內(nèi)ROS 水平有一定程度的增加，但亞硒酸鈉作用不顯著；亞硒酸鈉對超氧陰離子激活的磷酸化的ERK 水平有抑制作用，加入MAPKK