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1、血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)的成骨分化的直接結(jié)果就是形成血管鈣化,它是心血管疾病發(fā)生及死亡的關(guān)鍵危險(xiǎn)因子。已有大量文獻(xiàn)研究表明活性氧物種(ROS)通過(guò)多種機(jī)制促進(jìn)VSMCs向成骨細(xì)胞分化,而微量元素硒最重要的生物功能就是抗氧化。采用體外培養(yǎng)建立VSMCs鈣化模型,研究了硒、O2-·、鈣化VSMCs的成骨分化之間的關(guān)系及相關(guān)機(jī)理,其中通過(guò)黃嘌呤/黃嘌呤氧化酶體系(XXO)產(chǎn)生O2-·。
首先,RT-PCR結(jié)果顯示,Na2SeO3
2、抑制XXO誘導(dǎo)的成骨標(biāo)志物Runx2 mRNA的表達(dá),Runx2是VSMCs向成骨細(xì)胞分化關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子;XXO顯著增強(qiáng)鈣化VSMCs堿性磷酸酶(ALP)活性,上調(diào)基質(zhì)鈣沉積,且具有濃度依賴性,而0.1μmol/L Na2SeO3預(yù)處理24h可以明顯抑制XXO的此誘導(dǎo)作用。其次,Western Blot顯示XXO誘導(dǎo)Akt磷酸化,0.1μmol/L Na2SeO3預(yù)處理24h,MEK抑制劑2μmol/L PD98059預(yù)處理2h及PI3
3、K抑制劑25μmol/L LY294002預(yù)處理30min均能阻斷XXO誘導(dǎo)的Akt的磷酸化。同時(shí)還研究了兩種抑制劑對(duì)鈣化VSMCs的ALP活性及Runx2及Col-I表達(dá)的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)PD98059及LY294002預(yù)處理均抑制了XXO增強(qiáng)的ALP活性及Runx2及Col-I表達(dá)。最后,發(fā)現(xiàn)XXO能夠刺激胞內(nèi)氧化應(yīng)激的發(fā)生,主要表現(xiàn)在增加胞內(nèi)ROS水平及脂質(zhì)過(guò)氧化物MDA含量,使細(xì)胞凋亡率升高,而通過(guò)Na2SeO3預(yù)處理可以抑制氧化
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