丹參酮ⅡA對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在心梗大鼠體內(nèi)定向募集的影響及機(jī)制研究.pdf

1、研究TanIIA對(duì)BMSCs向梗死心肌募集的影響及機(jī)制，為中藥干預(yù)干細(xì)胞的研究提供一些新的思路。
　　 實(shí)驗(yàn)一：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在心肌梗死大鼠體內(nèi)定向募集的研究
　　 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模河^察靜脈移植BMSCs在心梗大鼠體內(nèi)的定向募集及分化情況。
　　 實(shí)驗(yàn)方法：采用結(jié)扎雌性大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支(LAD)的方法建立急性心肌梗死模型(MI)。MI3小時(shí)后靜脈移植5×106/0.5ml Dil標(biāo)記的BMSCs，1周或4周后取心

2、臟等臟器進(jìn)行冰凍切片。熒光顯微鏡觀察BMSCs移植1周后在各臟器中的分布情況；免疫熒光染色觀察BMSCs移植4周后在心臟受損部位的分化情況。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：心梗大鼠靜脈移植BMSCs后1周，可在心梗大鼠的心臟受損部位及其他特定器官如(肺、肝臟、脾臟、骨髓)中觀察到BMSCs；心梗大鼠靜脈移植BMSCs后4周，可在心梗部位發(fā)現(xiàn)少量BMSCs表達(dá)心肌特異性標(biāo)記(Connexin43和Troponin1)，但BMSCs仍保留干細(xì)胞形

3、態(tài)。
　　 實(shí)驗(yàn)二：丹參酮ⅡA對(duì)BMSCs在心梗大鼠體內(nèi)定向募集的影響及機(jī)制研究
　　 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模阂許DF-1/CXCR4軸為切入點(diǎn)，研究Tan II A對(duì)BMSCs向梗死心肌募集的影響及機(jī)制。
　　 實(shí)驗(yàn)方法：整體實(shí)驗(yàn)分為5組：①假手術(shù)組；②模型組；③TanⅡA治療組；④BMSCs移植治療組；⑤TanⅡA合并BMSCs移植治療組。治療1周或4周后，記錄大鼠血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)；以Real-time PCR相對(duì)定量募集

4、至心梗部位BMSCs數(shù)量；ELISA測(cè)定心梗大鼠血清及左心室壁SDF-1α蛋白的含量；Masson三色染色檢測(cè)心肌梗死程度及血管新生情況；免疫組化檢測(cè)VEGF的表達(dá)；體外遷移實(shí)驗(yàn)考察TanⅡA對(duì)于BMSCs體外遷移能力的影響；細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)BMSCs表面CXCR4表達(dá)情況。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：TanIIA能夠顯著增加BMSCs向心梗心臟的募集，并相應(yīng)的提高心功能，減小梗死面積，提高VEGF的表達(dá)，促進(jìn)血管新生。TanIIA能夠

5、適當(dāng)促進(jìn)心梗組織分泌SDF-1α，增強(qiáng)SDF-1α及HIF-1αmRNA的表達(dá)，提高血循環(huán)中SDF-1α的濃度。同時(shí)，它能夠增強(qiáng)體外培養(yǎng)BMSCs的CXCR4表達(dá)。體外遷移實(shí)驗(yàn)同樣證明，TanIIA能夠顯著提高BMSCs的遷移能力，并且這種促遷移能力可被CXCR4的拮抗劑AMD3100消除。結(jié)果說明，TanIIA是通過調(diào)控SDF1/CXCR4軸以促進(jìn)BMSCs向心梗部位的募集。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)論
　　 1、靜脈移植的BMS