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1、江南大學(xué)碩士學(xué)位論文BurkholderiamanaSYBCLI1產(chǎn)脂肪酶發(fā)酵條件優(yōu)化及酶學(xué)性質(zhì)研究姓名：惲麗紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：廖祥儒蔡宇杰20080801AbstractAbstractLipase，whichcatalysesthehydrolysisoflongchaintriglycerides，playedallimportantroleinindustrialcatalyzationCo
2、ld—activelipasehadrelativehighcatalyticactivityatlowtemperatureandgoodprospectinapplicationsMostcoldactivelipaseproducingmicroorganismswerepsychrophilesUsuallypsychrophilesweredifficulttocultureInthispaperahi曲lipaseprodu
3、cingstrainhadbeenscreenedfrommesophilicnaturalsoilsamplesAccordingtothemorphological，physiological，biochemicalidentificationand16SrDNAsequenceanalysis，thisstrainbelongedtoBurkholderiaandnamedas丑manaSYBCLI1Thefermentation
4、conditionsofBmanaSYBCLI1wasinvestigatedinshakeflaskTheoptimizedfermentationmediumcontained(g／L)：solublestarch10，yeastextract15，NaN030252，oliveoil40，OP10WhiletheoptimizedfermentationconditionWaS：pH75，30“C，200r／min，30mL／25
5、0mL，and10％fv／V)oftheinoculumsize，for48hUndersuchconditions，thelipaseactivityreached8523U／mL，whichwas363foldsofthatbeforeoptimizationThreemethodswereresearchedinthepurificationofBmariaSYBCLI一1lipase，includingammoniumsulph
6、atefractionalprecipitation，ethanolfractionalprecipitationandaqueoustwophasesystem(ATPS)TheoptimalsystemofATPSWas：PEG2000(w／w)10％，K2HP04(w／x聊15％，pH80Undertheseconditions，thepartitioncoefficiencyofthelipaseis37，purificatio
7、nfoldis41，andlipaseyieldis865％ThissystemcouldbeappliedtoseparationofcommercialproductionoflipaseFurthermore，thecharacteristicsofcrudelipaseWasinvestigated，itsoptimalpHWas95，withrelativeactivitieswereallabove75％attherangf
8、rompH35topH10ItsoptimaltemperatureWas20“C，andresidualactivityretained70％at0“C，belongedtothecoldactivelipaseItWasprovedtohavegoodtemperaturestabilitymorethan75％oftheinitialactivityretainedat60“Cfor60rain，乃elipaseactivityW
9、asstimulatedbyFe2andFe，：whileinhibitedbyC02andEDTAattheconcentrationof1mmoFLMoreoverthelipaseWasresistanttoalcoh01Keywords：Lipase；Screening；Burkholderia；OptimizationofFermentationConditions；AqueousTwoPhaseSystem；Characte
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