大鼠同源fasl39;sertoli細(xì)胞嵌合移植肝臟免疫豁免的研究

1、第一軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文大鼠同源FasLSertoli細(xì)胞嵌合移植肝臟免疫豁免的研究姓名：孟安啟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：泌尿外科學(xué)（器官移植學(xué)）指導(dǎo)教師：于立新20060516中文摘要盼藍(lán)染色對(duì)活S e r t o l i 細(xì)胞進(jìn)行記數(shù)鑒定，判斷睪丸S e r t o l i 細(xì)胞的活性、純度及單只大鼠獲取S e r t o l i 細(xì)胞的量。②細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)、F a s 阻斷試驗(yàn)及F a s L —m A b封閉試驗(yàn)：分離培養(yǎng)4 8 h

2、后的睪丸支持細(xì)胞與活化的淋巴細(xì)胞共同培養(yǎng)，M T T 法檢測(cè)其對(duì)淋巴細(xì)胞的殺傷作用及對(duì)淋巴細(xì)胞發(fā)揮最大作用時(shí)的濃度和時(shí)效性；應(yīng)用F a s I g G 抗體阻斷試驗(yàn)和F a s L - m A b 封閉試驗(yàn)評(píng)價(jià)睪丸支持細(xì)胞殺傷活化的淋巴細(xì)胞與F a s ／F a s L 系統(tǒng)之間的關(guān)系。二、F a s L + S e r t o l i 細(xì)胞對(duì)原位肝臟組織中F a s ／F a s L 表達(dá)的影響4 0 只S D 雌性大鼠隨機(jī)分為5 組

3、，每組8 只。在無菌手術(shù)操作下開腹直視經(jīng)門靜脈注入卜2 m l S e r t o l i 細(xì)胞，A 組：睪丸S e r t o l i 細(xì)胞1 ×1 0 6 ／m l ；B 組：睪丸S e r t o l i 細(xì)胞2 ×1 0 5 ／m l ：C 組：S e r t o l i 細(xì)胞1 X 1 0 7 ／m l ；D 組：S c r t o l i 細(xì)胞2 ×1 0 7 ／m 1 ；E 組( 對(duì)照組) ：

4、僅注射生理鹽水。1 4 天后取肝臟組織運(yùn)用免疫組化法及半定量R T - P C R ( Q R T —P C R ) 法，檢測(cè)肝臟內(nèi)嵌合S e r t o l i 細(xì)胞數(shù)及嵌合前后肝臟組織F a s L m R N A 含量變化。三、改良“二袖套”法大鼠原位肝臟移植模型的建立“二袖套”法在K a m a d a 吻合血管基礎(chǔ)上改良。供肝分別經(jīng)腹主動(dòng)脈和門靜脈雙重全肝臟灌注；受體肝臟分步切除，肝上下腔靜脈采用縫合法吻合，門靜脈和肝下下腔靜

5、脈分別用袖套法吻合。移植肝臟動(dòng)脈重建采用單純血管套入式吻合法，膽總管采用單管內(nèi)支架膽管端端吻合法。共實(shí)施大鼠原位肝臟移植2 0 2例，觀察術(shù)后并發(fā)癥及存活率并記錄異基因移植組自然存活時(shí)間。其中同基因組為S D - - S D ，異基因組為S D —W i s t a r ，預(yù)實(shí)驗(yàn)1 2 6 例，正式實(shí)驗(yàn)7 6 例。四、同源F a s L + S e r t o l i 細(xì)胞誘導(dǎo)大鼠移植肝臟免疫耐受的研究以S D 大鼠到W i s t a