三種檢測牛奶中氟喹諾酮類藥物殘留方法的比較研究.pdf

1、本論文主要是針對我國牛奶中存在抗生素殘留，且檢測體系不夠完善的現(xiàn)象，建立了牛奶中氟喹諾酮類藥物殘留檢測的高效液相色譜法、微生物法和酶聯(lián)免疫吸附試驗法，并對其進行了比較性研究，確定了不同檢測方法的適用范圍，以便為不同規(guī)模的乳品企業(yè)以及質(zhì)量監(jiān)督部門提供理論依據(jù)和技術參考。 1.建立了牛奶中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星三組份殘留檢測的高效液相色譜法。樣品經(jīng)磷酸鹽緩沖液提取，過固相萃取柱凈化，洗脫，洗脫液經(jīng)微孔濾膜過濾，采用熒光檢測器檢

2、測，外標法定量。恩諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星在0.005～0.5μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關系，相關系數(shù)為0.9997～0.9998；最低檢測限為0.005μg/mL，在添加濃度為0.050μg/mL、0.100μg/mL、0.200μg/mL時的平均回收率水平分布在71.5％～83.8％，CV均低于10％，符合殘留檢測要求。 2.建立了牛奶中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星三組份殘留檢測的微生物法—杯碟法，以枯草芽孢桿菌、藤

3、黃微球菌和短小芽孢桿菌為工作菌。根據(jù)—劑量法設計原理，通過檢測三種藥物在磷酸鹽緩沖液中的最低檢測限和在牛奶中的最低檢測限，以及回收率的大小，確定了檢測三種藥物的最適工作菌為枯草芽孢桿菌。結果表明：對于三種藥物，枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、藤黃微球菌的最適菌層濃度分別為0.8％、0.1％、0.5％；三種藥物在磷酸鹽緩沖液中的最低檢測限分布在0.025～0.5μg/mL；在牛奶中的最低檢測限分布在0.03～0.6μg/mL，標準曲線線性關系

4、良好，相關系數(shù)都大于0.98，平均回收率分布在63.2～81.0％，精密度良好，CV均小于10％，能夠滿足殘留檢測要求。 3.建立了牛奶中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星三組份殘留檢測的酶聯(lián)免疫吸附法．利用美國Beacon公司研制的試劑盒，原理是間接競爭ELISA方法。牛奶樣品經(jīng)二氯甲烷提取、離心后，取下層液體用氮氣吹干，進行測試，最后，在450nm處測量吸光度值，吸光度值與樣品中的氟喹諾酮藥物濃度成反比。結果表明：該試劑盒用來檢測