XPD基因?qū)MMC-7721細(xì)胞增殖、遷移及PTEN基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討人剪切修復(fù)基因XPD（XerodermapigmentosumD）轉(zhuǎn)染至人肝癌SMMC-7721細(xì)胞后，對腫瘤細(xì)胞增殖、遷移、凋亡以及PTEN基因表達(dá)的影響。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)使用脂質(zhì)體LipofectamineTM2000作為載體介質(zhì)，用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染法將空載質(zhì)粒pEGFP-N2和重組質(zhì)粒pEGFP-N2-XPD轉(zhuǎn)染入人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721細(xì)胞內(nèi)。實(shí)驗(yàn)分為四個(gè)組：空白對照組、脂質(zhì)體組、pEGFP-N2組、pEGFP-

2、N2-XPD組。通過熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白的表達(dá)；蛋白印跡（Westernblotting）法檢測腫瘤細(xì)胞中XPD和PTEN蛋白的表達(dá)水平；MTT法檢測腫瘤細(xì)胞的增殖水平；Transwell實(shí)驗(yàn)觀測腫瘤細(xì)胞遷移能力的改變；流式細(xì)胞儀檢測腫瘤細(xì)胞的凋亡水平。
　　結(jié)果：轉(zhuǎn)染空載質(zhì)粒pEGFP-N2和重組質(zhì)粒pEGFP-N2-XPD的人肝癌SMMC-7721細(xì)胞在熒光顯微鏡下均可見綠色熒光，表明轉(zhuǎn)染有效。pEGFP-N2-XPD組