海帶多糖對慢性腎功能衰竭及并發(fā)性血管鈣化的干預作用.pdf

1、海帶多糖是存在于海帶細胞中的一類天然生物大分子物質(zhì)，表現(xiàn)出多種生物活性。本文主要開展了海帶多糖(LJP61A)對腺嘌呤誘發(fā)的小鼠慢性腎功能衰竭及并發(fā)性血管鈣化的干預效果研究，并通過離體鈣化模型對體內(nèi)實驗進行驗證并探索LJP61A對血管平滑肌細胞鈣化形成的干預機制，現(xiàn)取得的研究結(jié)果如下：
　　(1)海帶多糖LJP61A對小鼠慢性腎功能衰竭的干預作用研究:采用腺嘌呤誘導的小鼠慢性腎功能衰竭實驗模型，通過檢測小鼠體重、腎臟病理損傷及血清

2、和尿液各項生化指標，探究LJP61A對腎功能衰竭是否存在干預作用。組織病理學研究顯示，LJP61A對腎臟代償性纖維化增生和腎小管損傷有一定的保護作用，呈量效關(guān)系。血清和尿液生化檢測結(jié)果顯示LJP61A可顯著降低慢性腎功能衰竭小鼠血清BUN、Crea水平，改善Ca2+、Mg2+、P3+等電解質(zhì)及蛋白質(zhì)代謝紊亂狀態(tài)，穩(wěn)定腎功能，表明LJP61A能顯著延緩腺嘌呤誘導的慢性腎功能衰竭病情的發(fā)展進程。
　　(2)海帶多糖LJP61A對慢性腎

3、功能衰竭小鼠并發(fā)性血管鈣化的干預作用研究:通過復制慢性腎功能衰竭鈣磷代謝紊亂引起的血管鈣化的同時給予LJP61A干預，病理檢測結(jié)果顯示LJP61A能明顯降低主動脈鈣和磷含量、ALP活性水平以及血清中PTH和FGF-23的含量;形態(tài)學研究和免疫組織化學分析結(jié)果顯示，海帶多糖能夠降低血管鈣化形成過程中的主動脈鈣磷鹽沉積現(xiàn)象，并上調(diào)平滑肌細胞上鈣敏感受體的表達;qRT-PCR和Western blotting結(jié)果顯示，LJP61A能顯著上調(diào)主

4、動脈組織中血管平滑肌細胞標志因子α-SMA、SM22α的基因表達以及降低Pit-1的基因表達，促進鈣化抑制因子MGP和OPG的蛋白表達，并且顯著降低骨分化相關(guān)蛋白Cbfa-1、OC、RANKL、BMP-2的表達。結(jié)果表明海帶多糖LJP61A對腺嘌呤誘發(fā)的慢性腎功能衰竭并發(fā)性血管鈣化的發(fā)生有較強的干預作用。
　　(3)海帶多糖LJP61A對β-GP誘導的小鼠血管平滑肌細胞鈣化的干預作用初探:采用β-GP誘導MOVAS細胞鈣化模型，當

5、LJP61A在濃度為25μg/mL時，明顯減少細胞內(nèi)的鈣化結(jié)節(jié)及ALP的分泌。qRT-PCR結(jié)果顯示，LJP61A能夠上調(diào)β-GP誘導的MOVAS細胞中MGP、OPN、α-SMA、SM22α的轉(zhuǎn)錄表達水平以及降低Pit-1的基因表達。Western blotting結(jié)果顯示，LJP61A能夠抑制內(nèi)源性鈣化促進因子Cbfa-1、OC、BMP-2和RANKL蛋白表達，并且顯著上調(diào)鈣化抑制因子OPG和MGP蛋白表達。綜上結(jié)果表明，LJP61A