PKC拮抗劑在TNF-α誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激中的機(jī)制研究.pdf

1、研究背景:
　　 近年發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮是一個(gè)十分活躍的內(nèi)分泌器官，它能感受生理刺激，同時(shí)做出調(diào)節(jié)性反應(yīng)，具有多種重要的生物活性。其通過分泌一系列血管活性物質(zhì)調(diào)節(jié)血管張力，細(xì)胞增殖、粘附以及影響凝血纖溶系統(tǒng)，以維持血管內(nèi)環(huán)境的平衡。血管內(nèi)皮也是多種心血管疾病危險(xiǎn)因子作用的重要靶器官。許多心血管疾病及危險(xiǎn)因素均可導(dǎo)致內(nèi)皮功能損傷，而內(nèi)皮功能損傷又常伴發(fā)和加重心血管疾病，兩者之間有著密切的聯(lián)系。因此保護(hù)內(nèi)皮的完整性和內(nèi)皮的功能已成為治療心

2、血管疾病的重要目標(biāo)之一。
　　 腫瘤壞死因子α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)作為一種具有多種生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞因子和重要的炎癥介導(dǎo)因子，其與心血管疾病關(guān)系的研究成為目前的熱點(diǎn)之一。研究發(fā)現(xiàn)心肌缺血再灌注損傷和慢性心衰、感染、內(nèi)毒血癥等各種疾病和病理狀態(tài)都將會直接或間接導(dǎo)致體內(nèi)TNF-α升高。許多以血管內(nèi)皮損傷為關(guān)鍵發(fā)病環(huán)節(jié)的疾病，均可觀察到此因子的升高。TNF-α介導(dǎo)的一系列信號通路將會啟動和加速動

3、脈硬化、血栓形成、血管重塑以及內(nèi)皮凋亡通路的激活。TNF-α可直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞表面的TNF受體產(chǎn)生直接的細(xì)胞毒作用，還可通過氧化應(yīng)激，影響脂代謝等方式損害內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)，使其功能紊亂，甚至凋亡。
　　 氧化應(yīng)激是機(jī)體氧化和抗氧化的失衡，其中間產(chǎn)物活性氧族(Reactive oxygenspecies，ROS)分為以超氧化物陰離子為代表的游離自由基和過氧化氫為代表的非游離自由基。研究表明超氧化物陰離子和過氧化物對動脈粥樣硬化進(jìn)展起

4、了極大的推動作用。NADPH氧化酶由兩個(gè)胞膜亞基p22phox和gp91phox/NOX2組成的細(xì)胞色素b558和胞漿亞基p47phox，p67phox，p40phox以及小GTP結(jié)合蛋白組成。在吞噬型細(xì)胞內(nèi)，當(dāng)胞漿亞基p47phox和p67phox發(fā)生從漿到膜的磷酸化及轉(zhuǎn)位時(shí)，NADPH氧化酶便發(fā)生激活。盡管NADPH氧化酶是激活內(nèi)皮細(xì)胞氧化還原反應(yīng)的重要酶體，但對此酶在內(nèi)皮細(xì)胞中的具體激活機(jī)制以及氧化產(chǎn)物的產(chǎn)生情況還了解甚少。

5、>　　 相關(guān)研究表明，蛋白激酶C(Protein kinase C，PKC)是由同工酶組成的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶家族，它可能介導(dǎo)了內(nèi)皮細(xì)胞NADPH氧化酶的激活。根據(jù)結(jié)構(gòu)和激活機(jī)制，PKC家族分為3種類型：第一種為依賴磷脂酰絲氨酸-二酰甘油-Ca2+的典型PKC(conventional PKC，cPKC)，包括α、βⅠ、βⅡ、γ亞型；第二種為不依賴Ca2+的新型PKC(novel PKC，nPKC)，包括δ、ε、μ、θ、η亞型；第