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1、惡性膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)常見(jiàn)的腫瘤之一,由于其位置的特殊性和高度侵襲性,目前常用的手術(shù)治療、化療及放療等治療手段常常難以達(dá)到理想效果,因此研究惡性膠質(zhì)瘤的新方法十分必要。近些年對(duì)腫瘤血管生成機(jī)制的認(rèn)識(shí)促進(jìn)了抗腫瘤血管生成的研究和應(yīng)用。我們前期研究證實(shí),本所自行研制的化合物諾帝對(duì)人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞系SHG-44和CHG-5及其裸鼠移植瘤有明顯的抑制生長(zhǎng)作用,并發(fā)現(xiàn)諾帝具有抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞血管生成因子VEGF表達(dá)的作用。為進(jìn)一步研究證實(shí)諾帝的體
2、內(nèi)外抗腫瘤作用及其機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)以大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系C6及其原位移植瘤為材料,觀察了諾帝對(duì)C6細(xì)胞趨化因子受體CXCR4功能性表達(dá)的影響及對(duì)C6原位移植瘤的生長(zhǎng)和血管生成的影響。 采用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測(cè)C6細(xì)胞CXCR4和VEGF蛋白表達(dá)陽(yáng)性;分別采用48孔趨化小室和激光共聚焦顯微術(shù)檢測(cè)了SDF-1α激活CXCR4誘導(dǎo)的C6細(xì)胞趨化運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞[Ca2+]i變化及諾帝的作用。結(jié)果顯示,在25~100ng/ml濃度范圍內(nèi)SDF-1α誘
3、導(dǎo)的C6細(xì)胞趨化運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞[Ca2+]i與空白對(duì)照相比均增強(qiáng),且有顯著性差異。而諾帝作用后抑制了C6細(xì)胞CXCR4、VEGF蛋白表達(dá)和SDF-1α激活CXCR4誘導(dǎo)的C6細(xì)胞趨化運(yùn)動(dòng)和[Ca2+]i升高。這些結(jié)果提示,諾帝對(duì)大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞功能性CXCR4表達(dá)具有明顯抑制作用。 采用立體定向腦原位接種C6細(xì)胞的方法進(jìn)行了Wistar大鼠膠質(zhì)瘤移植實(shí)驗(yàn),移植成瘤率100%。腫瘤在第1、2周生長(zhǎng)較緩慢,到第3、4周時(shí)腫瘤迅速增大,大鼠
4、開(kāi)始出現(xiàn)體重下降、眶周出血、甚至偏癱等明顯的癥狀。荷瘤大鼠平均生存期為25.50±5.75天,生存周期穩(wěn)定。移植瘤在腦實(shí)質(zhì)內(nèi)呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng),瘤細(xì)胞異型性明顯,有典型的柵欄狀壞死,瘤內(nèi)微血管豐富;免疫組織化學(xué)顯示瘤細(xì)胞GFAP蛋白弱陽(yáng)性,VEGF、CXCR4蛋白強(qiáng)陽(yáng)性。上述瘤組織病理學(xué)特征與人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤相似,能滿(mǎn)足膠質(zhì)瘤實(shí)驗(yàn)治療研究的要求。 利用C6腦膠質(zhì)瘤模型進(jìn)行體內(nèi)治療實(shí)驗(yàn)顯示,按27mg/kg體重腹腔注射諾帝,病理學(xué)檢查見(jiàn)
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