諾帝對大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系C6及其原位移植瘤功能性CXCR4的抑制作用.pdf

1、惡性膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)常見的腫瘤之一，由于其位置的特殊性和高度侵襲性，目前常用的手術(shù)治療、化療及放療等治療手段常常難以達到理想效果，因此研究惡性膠質(zhì)瘤的新方法十分必要。近些年對腫瘤血管生成機制的認(rèn)識促進了抗腫瘤血管生成的研究和應(yīng)用。我們前期研究證實，本所自行研制的化合物諾帝對人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞系SHG-44和CHG-5及其裸鼠移植瘤有明顯的抑制生長作用，并發(fā)現(xiàn)諾帝具有抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞血管生成因子VEGF表達的作用。為進一步研究證實諾帝的體

2、內(nèi)外抗腫瘤作用及其機制，本實驗以大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系C6及其原位移植瘤為材料，觀察了諾帝對C6細(xì)胞趨化因子受體CXCR4功能性表達的影響及對C6原位移植瘤的生長和血管生成的影響。 采用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測C6細(xì)胞CXCR4和VEGF蛋白表達陽性；分別采用48孔趨化小室和激光共聚焦顯微術(shù)檢測了SDF-1α激活CXCR4誘導(dǎo)的C6細(xì)胞趨化運動和細(xì)胞[Ca2+]i變化及諾帝的作用。結(jié)果顯示，在25～100ng/ml濃度范圍內(nèi)SDF-1α誘

3、導(dǎo)的C6細(xì)胞趨化運動和細(xì)胞[Ca2+]i與空白對照相比均增強，且有顯著性差異。而諾帝作用后抑制了C6細(xì)胞CXCR4、VEGF蛋白表達和SDF-1α激活CXCR4誘導(dǎo)的C6細(xì)胞趨化運動和[Ca2+]i升高。這些結(jié)果提示，諾帝對大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞功能性CXCR4表達具有明顯抑制作用。 采用立體定向腦原位接種C6細(xì)胞的方法進行了Wistar大鼠膠質(zhì)瘤移植實驗，移植成瘤率100％。腫瘤在第1、2周生長較緩慢，到第3、4周時腫瘤迅速增大，大鼠

4、開始出現(xiàn)體重下降、眶周出血、甚至偏癱等明顯的癥狀。荷瘤大鼠平均生存期為25.50±5.75天，生存周期穩(wěn)定。移植瘤在腦實質(zhì)內(nèi)呈浸潤性生長，瘤細(xì)胞異型性明顯，有典型的柵欄狀壞死，瘤內(nèi)微血管豐富；免疫組織化學(xué)顯示瘤細(xì)胞GFAP蛋白弱陽性，VEGF、CXCR4蛋白強陽性。上述瘤組織病理學(xué)特征與人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤相似，能滿足膠質(zhì)瘤實驗治療研究的要求。 利用C6腦膠質(zhì)瘤模型進行體內(nèi)治療實驗顯示，按27mg/kg體重腹腔注射諾帝，病理學(xué)檢查見