Th17細(xì)胞在特應(yīng)性皮炎發(fā)病中作用機(jī)制研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩57頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、背景:
  特應(yīng)性皮炎(atopicdermatitis,AD)作為兒童最常見的三大過敏性疾病之一,是一種慢性、瘙癢性、復(fù)發(fā)性、炎癥性皮膚病。AD發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,與遺傳易感基因、環(huán)境因素、免疫因素和皮膚屏障功能改變相關(guān)。長期以來,普遍觀點認(rèn)為Th1/Th2功能失衡是AD發(fā)病的基礎(chǔ),急性期表現(xiàn)為Th2細(xì)胞占優(yōu)勢,慢性期則Th1細(xì)胞占優(yōu)勢。然而Th1/Th2失衡理論并不能很好的解釋AD發(fā)病,隨著對機(jī)體抗微生物免疫機(jī)制的深入研究,新發(fā)現(xiàn)的

2、Th細(xì)胞家族成員Th17細(xì)胞成為國內(nèi)外研究的焦點。很多研究表明Th17細(xì)胞在自身免疫性炎癥性疾病發(fā)生發(fā)展過程中起著關(guān)鍵的作用,2003年Toda等人首次報道AD患者急性皮損中高表達(dá)IL-17后,相繼有研究報道發(fā)現(xiàn)AD患者皮損及外周血中Th17細(xì)胞及細(xì)胞因子IL-17水平明顯高于正常人,提示Th17細(xì)胞在AD炎癥發(fā)生中有著重要作用,但具體機(jī)制尚不清楚。FK506(他克莫司)作為一種T細(xì)胞抑制劑,已廣泛用于AD治療,可明顯緩解AD癥狀,但其

3、是否通過Th17細(xì)胞途徑實現(xiàn)對AD的治療尚不明確。SEB(金黃色葡萄球菌腸毒素B)作為金黃色葡萄球菌分泌的一種超抗原,誘發(fā)或加重AD的機(jī)制是否與Th細(xì)胞亞群改變有關(guān)也不清楚。
  目的:
  本研究通過檢測急性期中~重度AD患兒外周血Th細(xì)胞亞群比例,F(xiàn)K506和SEB對Th17細(xì)胞特異性核轉(zhuǎn)錄因子RORγt的作用及對PBMC(外周血單個核淋巴細(xì)胞)分泌細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17的影響。以探討Th17細(xì)胞在AD

4、發(fā)病中的作用,以及FK506和SEB對其影響。
  方法:
  1.符合Hanifin-Rajka診斷標(biāo)準(zhǔn)的急性期中~重度AD患兒86例(男50,女36),SCORAD評分33~80,平均56.12±11.85,年齡0.25~14.75歲,平均5.39±4.04歲。健康對照組兒童81例(男48女33),年齡2.92~14.08歲,平均5.65±2.02歲。
  2.本研究用PMA(佛波酯)+Ionomycin(離子霉素

5、)或SEB對AD患兒或健康對照PBMC進(jìn)行處理,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測Th細(xì)胞亞群比例;ELISA法檢測FK506和SEB對PBMC分泌細(xì)胞因子IFN-γ,IL-4,IL-17水平的影響,同時實時熒光定量RT-PCR法檢測FK506和SEB對Th17細(xì)胞特異性核轉(zhuǎn)錄因子RORγt改變的影響。
  結(jié)果:
  1.PBMC中各Th細(xì)胞亞群比例:1)PMA+Ionomycin刺激PBMC后,AD患兒組外周血Th17、Th2細(xì)胞比例較

6、健康對照組顯著升高,Th1細(xì)胞比例較健康對照組顯著降低。AD患兒組與健康對照組比較,Th17細(xì)胞比例升高(1.30±0.62vs0.63±0.27,p<0.001),Th1細(xì)胞比例降低(9.16±4.21vs20.07±5.13,p<0.001),Th2細(xì)胞比例升高(9.16±4.21vs20.07±5.13,p<0.001),有統(tǒng)計學(xué)顯著差異。2)SEB干預(yù)后,比較AD患兒組和健康對照組Th亞群表達(dá),Th17細(xì)胞比例均很低(0.19±

7、0.14vs0.24±0.20,p>0.05),無明顯差異,Th1細(xì)胞比例AD組明顯低于對照組(3.43±1.88vs10.08±3.96,p<0.001),Th2細(xì)胞比例AD組明顯高于對照組(2.38±2.33vs0.57±0.33,p<0.001)。
  2.FK506和SEB對RORγtmRNA表達(dá)的影響:1)AD患兒組RORγtmRNA表達(dá)顯著高于健康對照組(2.64±2.31vs0.83±0.44,p<0.01)。2)F

8、K506對RORγtmRNA表達(dá)水平的影響:FK506干預(yù)后AD患兒組和健康對照組RORγtmRNA表達(dá)均降低。AD患兒FK506干預(yù)組低于未干預(yù)組(0.26±0.23vs2.64±2.31,p<0.001),健康對照FK506干預(yù)組低于未干預(yù)組(0.20±0.18vs0.83±0.44,p<0.001)。3)SEB對RORγtmRNA表達(dá)水平的影響:SEB干預(yù)后AD患兒組RORγtmRNA水平明顯高于健康對照組(1.51±1.05vs

9、0.39±0.28,p<0.001)。
  3.FK506和SEB對PBMC分泌細(xì)胞因子的影響:1)未經(jīng)干預(yù)的AD患兒組IL-17和IL-4水平均明顯高于對照組,IFN-γ水平明顯低于健康對照組。AD患兒組與健康對照組比較,IL-17水平升高(638.01±152.85vs369.57±107.22,p<0.001),IFN-γ水平降低(653.53±133.80vs1123.66±218.36,p<0.001),IL-4水平升高

10、(537.15±160.73vs294.30±59.01,p<0.001),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2)FK506對PBMC分泌細(xì)胞因子的影響:FK506干預(yù)后,AD患兒組和健康對照組IL-17、IFN-γ、IL-4水平均明顯降低。①IL-17水平:AD患兒FK506干預(yù)組低于未干預(yù)組(160.87±65.63vs638.01±152.85,p<0.001),健康對照FK506干預(yù)組低于未干預(yù)組(147.66±67.69vs369.57±10

11、7.22,p<0.001);②IFN-γ水平:AD患兒FK506干預(yù)組明顯低于未干預(yù)組(305.87±86.16vs653.53±133.80,p<0.001),健康對照FK506干預(yù)組明顯低于未干預(yù)組(380.67±128.54vs1123.66±218.36,p<0.001);③IL-4水平:AD患兒FK506干預(yù)組明顯低于未干預(yù)組(61.36±33.48vs537.15±160.73,p<0.001),健康對照FK506干預(yù)組明顯

12、低于未干預(yù)組(134.12±34.71vs294.30±59.01,p<0.001)。3)SEB對PBMC分泌細(xì)胞因子的影響:AD患兒組與健康對照組比較,IL-17和IL-4水平明顯升高,IFN-γ水平明顯降低。AD患兒組IL-17水平明顯高于健康對照組(593.50±119.16lvs284.23±84.69,p<0.001),IFN-γ水平明顯低于健康對照組548.46±99.70vs943.98±254.07,p<0.001),I

13、L-4水平明顯高于健康對照組462.71±109.63vs274.51±48.67,p<0.001)。
  結(jié)論:
  1.急性期中~重度AD患兒外周血Th細(xì)胞亞群存在比例失衡,AD患兒組Th17、Th2細(xì)胞比例較健康對照組升高,Th1細(xì)胞比例較健康對照組降低;PBMC分泌的細(xì)胞因子IL-17和IL-4水平AD組明顯高于對照組,IFN-γ明顯低于對照組,反映AD患兒體內(nèi)存在Th細(xì)胞亞群失衡,急性期表現(xiàn)為Th17細(xì)胞和Th2細(xì)

14、胞優(yōu)勢表達(dá)。
  2.檢測AD患兒和健康對照外周血Th17細(xì)胞特異性核轉(zhuǎn)錄因子RORγtmRNA表達(dá),發(fā)現(xiàn)其在AD患兒外周血中表達(dá)明顯高于健康對照組,提示急性期AD患兒存在Th17細(xì)胞高表達(dá)。在AD患兒組和健康對照組中,F(xiàn)K506對RORγtmRNA表達(dá)均有顯著抑制作用,提示FK506降低Th17細(xì)胞分化可能是緩解AD急性炎癥反應(yīng)的機(jī)制之一。
  3.AD患兒PBMC經(jīng)SEB處理后,Th細(xì)胞亞群失衡,表現(xiàn)為Th17、Th2細(xì)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論