CD8+T細胞免疫壓力對丙型肝炎病毒進化的影響.pdf

1、目的:已有文獻報道丙型肝炎病毒（HCV）感染過程中CD8+T細胞免疫壓力可以導致病毒變異的出現(xiàn)。但是，這種免疫適應過程在群體水平上對于病毒進化的影響還不是很清楚。在本研究中我們利用44例慢性丙型肝炎患者研究病毒NS3 區(qū)的適應過程，初步篩查湖北地區(qū)HCV流行株中CD8表位的適應性變異情況。
　　 方法:分離了69例HCV 感染患者體內(nèi)的病毒，以巢式PCR對HCV NS3 區(qū)進擴增并測序，同時對18條全長HCV NS3區(qū)的已知CD

2、8表位區(qū)內(nèi)部及外部的突變位點進行分析。此外，還分析了不同HLA-Ⅰ限制性免疫壓力作用下位點的變異情況。
　　 結(jié)果：在已知CD8表位內(nèi)部的突變頻率明顯高于表位外部。我們通過對測序結(jié)果的比對分析發(fā)現(xiàn)在NS3 區(qū)的631個氨基酸中有7個（V1274I/T：95％；Y1444F：68％； T1636I：63％；S1148G：76％；L1382I：75％；S1560G：56％；A1647T：40％）突變頻率較高的氨基酸殘基。有意義的是，

3、7個氨基酸殘基中有5個（V1274I/T：95％；Y1444F：68％；T1636I：63％；S1148G：76％；L1382I：75％；）位于CD8表位內(nèi)部。群體水平上，HLA等位基因頻率較高的人群其相應的限制性CD8表位突變頻率相當高，這就提示群體水平上免疫壓力的重現(xiàn)性（即在擁有同種HLA等位基因的群體中，免疫壓力可以持續(xù)作用于該表位，促使該突變表位在群體中累積下來）。
　　 結(jié)論：CD8+T細胞免疫壓力對丙型肝炎病毒進化有

4、重要的影響，HLA-Ⅰ相關(guān)的選擇性壓力是病毒NS3 進化的主要驅(qū)動力。群體水平上HCV 對CD8+T細胞免疫壓力的適應使疫苗的設計更加復雜化。
　　 本課題的創(chuàng)新點：1.基于歐洲人群與中國人群HLA等位基因頻率不同，我們檢測中國人群中頻率較高的HLA等位基因相應限制性表位的變異情況，進一步分析CD8表位變異與HLA 多態(tài)性的相關(guān)性。2.國內(nèi)既往多項研究集中關(guān)注于HCV 變異與CTL表位關(guān)系的研究，僅少數(shù)關(guān)于HLA-I 類限制性等