RNAi沉默APE1-Ref-1增強吉西他濱對胰腺癌細胞SW1990化療敏感性的體內外研究.pdf

1、上海交通大學碩士學位論文RNAi沉默APE1Ref1增強吉西他濱對胰腺癌細胞SW1990化療敏感性的體內外研究姓名：孫慧玲申請學位級別：碩士專業(yè)：內科學（消化內科）指導教師：吳叔明20090401上海交通大學醫(yī)學院2009屆碩士學位中文摘要V采用流式細胞術和Hochest33258染色檢測其誘導SW1990細胞凋亡及對化療的増敏作用；2.構建靶向APE1Ref1的慢病毒載體，并建立裸鼠皮下胰腺癌移植瘤模型，用攜帶APE1Ref1基因的慢

2、病毒上清瘤內注射和吉西他濱腹腔內注射聯合治療，觀察裸鼠腫瘤生長情況，繪制腫瘤生長曲線，計算抑瘤率，并用免疫組織化學方法檢測腫瘤組織APE1Ref1蛋白表達情況。【結果】體外實驗中，RNA干擾APE1Ref1基因能夠降低mRNA和蛋白的表達，對蛋白的抑制率為（55.413.58）%，可抑制SW1990細胞增殖，干擾24h、48h和72h抑制率分別為（41.692.78）%、（24.833.70）%、（21.279.82）%；流式檢測測細胞

3、凋亡，較對照組，吉西他濱組、siAPE1組和聯合組均可見明顯凋亡的凋亡，早期凋亡率分別為（2.731.41）%、（7.71.14）%、（8.370.98）%、（19.83.47）%，Hochest染色可見聯合組有明顯的凋亡核形態(tài)學變化。體內試驗中，慢病毒載體介導的RNA干擾沉默APE1Ref1基因，聯合治療組和對照組、吉西他濱組、RNA干擾單用組腫瘤大小間存在明顯差異，與對照組相比，RNA干擾組、吉西他濱組、聯合組抑瘤率分別為22.56

4、%、50.91%、66.37%，免疫組化檢測發(fā)現慢病毒介導的RNA干擾能夠成功沉默APE1Ref1基因。【結論】1.RNA干擾沉默APE1Ref1基因能夠在體內外抑制胰腺癌SW1990的生長2.慢病毒載體pGCLGFPU6APE1siRNA可特異性地沉默胰腺癌SW1990細胞表達；3.RNA干擾沉默APE1Ref1基因能夠增強吉西他濱對胰腺癌的化療作用；4.慢病毒與吉西他濱聯合治療胰腺癌，可以作為腫瘤基因治療的載體。關鍵詞：胰腺癌；AP