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1、小腦顆粒神經(jīng)元(CGNs)是哺乳動(dòng)物腦中最豐富的中樞神經(jīng)元.體外培養(yǎng)該神經(jīng)元時(shí),含25mM KCl(高鉀)的培養(yǎng)基可維持小腦顆粒神經(jīng)元的分化、成熟和存活,而去血清、復(fù)極化濃度的KCl(5mM,低鉀)培養(yǎng)基可誘導(dǎo)分化成熟的小腦顆粒神經(jīng)元凋亡.正因?yàn)樾∧X顆粒神經(jīng)元來(lái)源豐富、體外培養(yǎng)的同質(zhì)性高,所以此凋亡模型已被廣泛應(yīng)用于中樞神經(jīng)元凋亡機(jī)制的研究和防治與凋亡有關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病的新藥開(kāi)發(fā)中.BH3-only蛋白Bim在神經(jīng)元凋亡中發(fā)揮了重要作用
2、,Bim蛋白的活性可在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后和翻譯后三個(gè)水平進(jìn)行調(diào)控.一些研究結(jié)果表明JNK/c-jun通路、PI3K/AKT通路、Ras/MAPK通路及轉(zhuǎn)錄因子E2F1介導(dǎo)了Bim的表達(dá),但目前尚存在爭(zhēng)議;轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)主要體現(xiàn)在盡管多種Bim轉(zhuǎn)錄子在神經(jīng)元中都可形成,但表達(dá)產(chǎn)物卻以BimEL蛋白為主;此外,翻譯后調(diào)節(jié)也是Bim活性調(diào)控的重要方式:通常情況下BimEL和BimL與微管復(fù)合體動(dòng)力蛋白輕鏈LC8結(jié)合被阻滯于胞漿,凋亡刺激使它們釋放并與B
3、cl-2結(jié)合發(fā)揮促凋亡作用;另外,已經(jīng)證明BimEL能夠被JNK磷酸化而增強(qiáng)其促凋亡作用,但被ERK1/2磷酸化后卻更易被蛋白酶體降解;最后,最近的研究發(fā)現(xiàn)磷酸化的BimEL可以被casepase剪切,剪切后的BimEL與Bcl-2的親和力增強(qiáng),從而進(jìn)一步促進(jìn)凋亡.Bim轉(zhuǎn)錄調(diào)控是近年來(lái)神經(jīng)元凋亡機(jī)制研究中的熱門(mén)課題.研究表明轉(zhuǎn)錄因子Egr-1在神經(jīng)元凋亡中發(fā)揮了重要作用,但它的作用靶點(diǎn)尚不清楚.該研究采用免疫印跡、基因轉(zhuǎn)染、報(bào)告基因等
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