沉默癌基因Bmi1表達(dá)對肝癌在裸鼠體內(nèi)發(fā)生發(fā)展的影響.pdf

1、肝細(xì)胞肝癌（HCC）是世界上最常見的惡性腫瘤之一，其致死率在所有癌癥中排名第三位。肝癌治療手段十分有限，目前仍以手術(shù)切除作為主要治療方法。但此方法存在著眾多缺點，如適用患者有限、術(shù)后易復(fù)發(fā)、生存率低等。因此研究肝癌的發(fā)病機制，尋找有效的治療靶點并開發(fā)針對性的治療藥物就成為肝癌研究的重要方向。Bmi1基因是多梳基因家族中的一員，主要參與調(diào)控細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖和衰老過程，在多種腫瘤中都存在表達(dá)失調(diào)。在前期研究中我們發(fā)現(xiàn)Bmi1在肝癌樣本中存

2、在高表達(dá)，在小鼠體內(nèi)過表達(dá)Bmi1可以驅(qū)動肝癌的發(fā)生，因此Bmi1是驅(qū)動肝癌發(fā)生的一個重要癌基因。前期研究還發(fā)現(xiàn)，關(guān)閉Bmi1的表達(dá)可以在體外抑制肝癌細(xì)胞的生長，這提示有可能Bmi1不僅可以驅(qū)動肝癌發(fā)生，而且可能對于維持肝癌生長也是必需的。因此，我們有必要探究在體內(nèi)沉默Bmi1是否能產(chǎn)生同樣的效果。與此同時，我們前期研究還發(fā)現(xiàn)該基因在原發(fā)性肝癌中的作用不依賴于其經(jīng)典靶點Ink4a/Arf，其具體的分子機制還不十分清楚。因此在本研究中，我

3、們也探尋了Bmi1調(diào)控肝癌生長的分子機制。具體來說，在本研究中，我們首先確定了在腫瘤生長早期關(guān)閉Bmi1的表達(dá)對肝癌生長的影響，我們發(fā)現(xiàn)直接關(guān)閉Bmi1確實可以抑制肝癌細(xì)胞的生長，同時降低肝癌細(xì)胞的成瘤能力。為了探尋在腫瘤快速生長階段關(guān)閉Bmi1對肝癌生長的影響，我們利用tet-on系統(tǒng)建立了一種可調(diào)控Bmi1表達(dá)的Bmi1 shRNA表達(dá)載體，利用慢病毒將此載體轉(zhuǎn)入正常的肝癌細(xì)胞中，以達(dá)到調(diào)控肝癌細(xì)胞中Bmi1表達(dá)的目的。我們利用此調(diào)

4、控載體在體內(nèi)關(guān)閉Bmi1的表達(dá)，結(jié)果顯示在腫瘤快速生長階段關(guān)閉Bmi1的表達(dá)可以使腫瘤停止生長甚至萎縮。利用表達(dá)譜基因芯片，我們發(fā)現(xiàn)Bmi1對腫瘤生長調(diào)控的主要途徑是調(diào)控腫瘤的代謝，結(jié)合qRT-PCR方法我們對Bmi1可能的下游靶位點進(jìn)行了探索，我們發(fā)現(xiàn)TGFβ2和AREG可能是Bmi1調(diào)控肝癌生長的重要靶點。
　　綜上所述，我們的研究揭示了Bmi1基因在維持肝癌體內(nèi)生長中的重要作用，提示Bmi1可以作為肝癌治療的一個重要靶點。與