櫻桃花色苷的降脂作用及其機(jī)制研究.pdf

1、脂質(zhì)沉積是指肝、胰或者脂肪組織中脂滴數(shù)量顯著增多且聚集。脂質(zhì)異位沉積對(duì)骨骼肌、胰島β細(xì)胞、肝臟等均有一定的脂毒性作用，并且與糖尿病、脂肪肝、高脂血癥等疾病發(fā)生密切相關(guān)。現(xiàn)有的降脂藥物均具有一定的副作用及不良反應(yīng)。作為藥食同源的美味佳果，櫻桃富含多種活性營(yíng)養(yǎng)成分，其中花色苷含量可達(dá)4-450mg/100g鮮重。櫻桃花色苷有抗氧化、預(yù)防心血管疾病以及降脂減肥等功效，可降低膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平

2、，提高載脂蛋白(ApoA)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)表達(dá)水平。因此，從櫻桃中分離制備花色苷并研究其降脂功效具有重要意義。
　　本課題從櫻桃中提取櫻桃花色苷并對(duì)櫻桃花色苷的組分及總黃酮、總多酚含量進(jìn)行測(cè)定并分析了櫻桃花色苷的抗氧化活性及其對(duì)細(xì)胞脂質(zhì)沉積的抑制改善作用，探討了細(xì)胞自噬在櫻桃花色苷抑制改善細(xì)胞脂質(zhì)沉積中的作用。課題主要研究結(jié)果如下:
　　1.分離純化所得的櫻桃花色苷經(jīng)HPLC組分鑒定發(fā)現(xiàn)其主要成分矢車菊素-

3、3-葡萄糖苷、矢車菊素-3-蕓香糖苷、花葵素-3-葡萄糖苷。運(yùn)用DPPH、ATBS等體外抗氧化實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)合熒光探針對(duì)櫻桃花色苷的抗氧化活性進(jìn)行評(píng)價(jià)分析證實(shí)了櫻桃花色苷有較強(qiáng)的體外抗氧化能力，且對(duì)丙烯酰胺(AA)誘導(dǎo)LO2細(xì)胞形成的氧化應(yīng)激模型有較好的保護(hù)作用。
　　2.利用油酸(OA)孵育誘導(dǎo)HepG2、LO2細(xì)胞建立的細(xì)胞脂肪沉積模型評(píng)價(jià)櫻桃花色苷對(duì)細(xì)胞脂質(zhì)沉積的抑制改善作用，證實(shí)櫻桃花色苷對(duì)HepG2、LO2細(xì)胞脂質(zhì)沉積

4、有顯著改善作用。櫻桃花色苷可顯著降低細(xì)胞甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量水平。
　　3.結(jié)合透射電鏡、免疫熒光等實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探討細(xì)胞自噬在櫻桃花色苷抑制改善細(xì)胞脂質(zhì)沉積中的作用，發(fā)現(xiàn)櫻桃花色苷可通過促進(jìn)細(xì)胞自噬體形成，上調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3、Atg5、Beclin1表達(dá)水平，下調(diào)P62的表達(dá)水平進(jìn)一步緩解抑制HepG2、LO2脂質(zhì)沉積作用，櫻桃花色苷可下調(diào)脂肪酸合成相關(guān)蛋白FA