P53在高氧致胎鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞KGFR表達變化中的作用研究.pdf

1、目的：探討胎鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞(AECⅡ)角化細胞生長因子受體(KGFR)在高氧暴露過程中表達的變化及其與P53的關系。
　　方法：原代培養(yǎng)胎鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞,并隨機分為對照組、高氧組和高氧+Pifithrin組。流式細胞儀檢測細胞內(nèi)ROS水平的變化;Real-time PCR檢測KGFR mRNA的表達;Western Blot檢測細胞KGFR,P-P53(ser392)蛋白的表達。
　　結果：(1)隨著高氧干預時間的延

2、長,肺泡Ⅱ型上皮細胞ROS值逐漸升高[(165.86±5.290)~(920.86±2.896),(P<0.01)],8h時達極點;
　　(2)與對照組比較,高氧1h時,胎鼠AECⅡKGFR mRNA的表達即明顯下降,4h時表達繼續(xù)下降。高氧1h和4h時,其表達量分別為對照組的0.89倍和0.45倍(P<0.01)。
　　(3)Western blot結果顯示:與對照組比較,高氧4h時,胎鼠AECⅡKGFR蛋白的表達即明顯下

3、降,12h時達極點,以后下降趨勢逐漸減弱。高氧4、8、12、24和48h時,其下降幅度分別為1.3、1.6、1.9、1.3和1.2倍(P<0.01)。高氧4、8和12h時,高氧組P-P53(ser392)蛋白的表達均明顯高于同時間點對照組(P<0.01)。并且在4h時達到高峰,然后隨時間的延長表達逐漸下降;與高氧組比較,高氧+Pifithrin組P-P53(ser392)蛋白的表達明顯下降(P<0.01),KGFR蛋白的表達得以恢復(P