基因修飾的生物人工血管.pdf

1、人工血管在血管搭橋、急性血管損傷修復(fù)中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,僅美國(guó)每年就有60萬(wàn)人需進(jìn)行冠脈搭橋手術(shù).冠脈搭橋需要小直徑血管,用自體靜脈移植其順應(yīng)性不足,用人工血管可進(jìn)行冠脈搭橋,但目前直徑小于6mm的人工血管移植6個(gè)月后血栓率高達(dá)40﹪,另外人工血管用于急性血管損傷替代治療因來(lái)不及取病人自身的細(xì)胞種植,還必需克服同種移植排斥反應(yīng),因而如何改善移植血管的力學(xué)特性及生物相容性,防止血管閉塞,是構(gòu)建小直徑工程血管面臨的主要問(wèn)題.目前研究集中在

2、單純加強(qiáng)種子細(xì)胞的種植粘附,缺乏用基因工程方法修飾種子細(xì)胞以對(duì)抗冠脈搭橋、急性血管損傷修復(fù)前后各種致病因子對(duì)種植細(xì)胞的損傷,另外工程血管的應(yīng)用面臨保存問(wèn)題,常規(guī)的保存方法不能很好地保留細(xì)胞活性.基于以上考慮該研究探討用豬動(dòng)脈作為小直徑血管支架材料的可行性,采用生物酶法處理豬動(dòng)脈,檢測(cè)處理前后血管的抗原表達(dá)及力學(xué)特性是否適合作為人工血管基質(zhì)材料.將A20基因應(yīng)用于小直徑血管構(gòu)建,用RT-PCR法檢測(cè)各種損傷因子作用下A20基因在內(nèi)皮細(xì)胞的

3、表達(dá)情況.采用構(gòu)建成功的pEGFPEHA20-N1、pCDNA3.1EAH20真核表達(dá)載體,檢測(cè)A20基在對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用及抑制平滑肌細(xì)胞的病理性增殖情況.運(yùn)用TGFβ<,1>基因從細(xì)胞內(nèi)部入手加強(qiáng)細(xì)胞與基質(zhì)的粘附,用微管吸吮系統(tǒng)檢測(cè)TGFβ<,1>對(duì)血管細(xì)胞與基質(zhì)材料的粘附情況.在自行設(shè)計(jì)研制的血管生物反應(yīng)器中,運(yùn)用已分離培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞,以去細(xì)胞的豬血管作為基質(zhì)材料,構(gòu)建新的生物人工血管.將構(gòu)建的新血管用于大鼠移