基因修飾的生物人工血管.pdf

1、人工血管在血管搭橋、急性血管損傷修復(fù)中具有廣泛的應(yīng)用價值,僅美國每年就有60萬人需進行冠脈搭橋手術(shù).冠脈搭橋需要小直徑血管,用自體靜脈移植其順應(yīng)性不足,用人工血管可進行冠脈搭橋,但目前直徑小于6mm的人工血管移植6個月后血栓率高達(dá)40﹪,另外人工血管用于急性血管損傷替代治療因來不及取病人自身的細(xì)胞種植,還必需克服同種移植排斥反應(yīng),因而如何改善移植血管的力學(xué)特性及生物相容性,防止血管閉塞,是構(gòu)建小直徑工程血管面臨的主要問題.目前研究集中在

2、單純加強種子細(xì)胞的種植粘附,缺乏用基因工程方法修飾種子細(xì)胞以對抗冠脈搭橋、急性血管損傷修復(fù)前后各種致病因子對種植細(xì)胞的損傷,另外工程血管的應(yīng)用面臨保存問題,常規(guī)的保存方法不能很好地保留細(xì)胞活性.基于以上考慮該研究探討用豬動脈作為小直徑血管支架材料的可行性,采用生物酶法處理豬動脈,檢測處理前后血管的抗原表達(dá)及力學(xué)特性是否適合作為人工血管基質(zhì)材料.將A20基因應(yīng)用于小直徑血管構(gòu)建,用RT-PCR法檢測各種損傷因子作用下A20基因在內(nèi)皮細(xì)胞的

3、表達(dá)情況.采用構(gòu)建成功的pEGFPEHA20-N1、pCDNA3.1EAH20真核表達(dá)載體,檢測A20基在對內(nèi)皮細(xì)胞的保護作用及抑制平滑肌細(xì)胞的病理性增殖情況.運用TGFβ<,1>基因從細(xì)胞內(nèi)部入手加強細(xì)胞與基質(zhì)的粘附,用微管吸吮系統(tǒng)檢測TGFβ<,1>對血管細(xì)胞與基質(zhì)材料的粘附情況.在自行設(shè)計研制的血管生物反應(yīng)器中,運用已分離培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞,以去細(xì)胞的豬血管作為基質(zhì)材料,構(gòu)建新的生物人工血管.將構(gòu)建的新血管用于大鼠移