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1、分類號(hào):S墨三!:三密級(jí):公玨單位代碼:!QQ墨魚學(xué)號(hào):—2009—456蛋雞小肽載體PepTlmRNA表達(dá)及其調(diào)控機(jī)制的研究StduyonexpressionofsmallpeptidescarrierPepTlmRNAandthemechanismofit’Sregulationoflayer學(xué)位申請(qǐng)人:梁陳沖指導(dǎo)教師:陳寶江教授學(xué)科專業(yè):動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)學(xué)位類別:農(nóng)學(xué)碩士授予單位:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期:二。一二年五月二十三日摘要
2、本論文研究了小肽載體在蛋雞腸道不同部位的表達(dá)特點(diǎn),并探討了不同蛋白源供應(yīng)形式對(duì)蛋雞消化道肽載體的影響,以及外源激素和生長(zhǎng)因子對(duì)蛋雞PepTl基因表達(dá)的調(diào)控作用。試驗(yàn)一研究探討了蛋雞肽轉(zhuǎn)運(yùn)載體PepTlmRNA表達(dá)的RTPCR評(píng)定方法及蛋雞腸道不同部位肽載體PepTlmRNA的表達(dá)形式、分布特點(diǎn)。根據(jù)肽載體ePepTlmRNA和看家基因[3aetinmRNA序列,分別設(shè)計(jì)cPepTl和flactin引物各一對(duì),通過溫度、循環(huán)數(shù)等PCR條件
3、的優(yōu)化,建立包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR的蛋雞小腸cPepTl基因檢測(cè)方法,應(yīng)用該方法研究蛋雞cPepTl基因在小腸各段的表達(dá)差異。結(jié)果顯示,蛋雞空腸部位PepTlmRNA的表達(dá)水平顯著高于十二指腸(胙O05),與回腸比差異不顯著(pO05),十二指腸PepTlmRNA的表達(dá)水平與回腸之間無顯著差異(p005)。試驗(yàn)二分別應(yīng)用游離氨基酸、小肽(酪蛋白水解物)、酪蛋白為氮源,配制純合日糧,飼喂蛋雞,應(yīng)用RTPCR技術(shù)檢測(cè)腸道轉(zhuǎn)運(yùn)載體Pe
4、pTlmRNA表達(dá)量的變化,從而確定蛋白源形式對(duì)肽載體PepTlmRNA表達(dá)的影響大小和規(guī)律。結(jié)果表明:以小肽為氮源的試驗(yàn)組蛋雞小腸不同腸段轉(zhuǎn)運(yùn)載體PepTlmRNA表達(dá)量較飼喂游離氨基酸和酪蛋白組明顯提高(pO05),而游離氨基酸組和酪蛋白組間差異不顯著(礦O05)。試驗(yàn)三研究了外源激素和生長(zhǎng)因子對(duì)蛋雞PepTlmRNA表達(dá)的調(diào)控作用。成年蛋雞42只,隨機(jī)分為7組,分別接受表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、甲狀腺素、胰島素、胰高血糖素、腎上腺素
5、受體激動(dòng)劑、甲硫咪唑刺激,劑量分別為003mg/kg、330ug/kg、O1mg/kg、O1mg/kg、003mg/kg、25mg/kg,對(duì)照組注射蒸餾水,每日一次,連續(xù)5d,取小腸檢測(cè)腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)載體表達(dá)量變化。結(jié)果表明:EGF對(duì)蛋雞小腸PepTlmRNA表達(dá)量有降低的趨勢(shì);皮下注射胰島素、胰高血糖素、腎上腺素受體激動(dòng)劑和口服甲狀腺素后對(duì)蛋雞十二指腸PepTlmRNA表達(dá)量有上調(diào)的作用,其中胰島素的上調(diào)作用最為明顯;皮下注射胰島素和口服
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