2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:創(chuàng)面修復在臨床上仍然是一個巨大的挑戰(zhàn)。將成纖維細胞生長因子(FGFs)與含有肝素的聚合物水凝膠結合被認為是一個提高傷口愈合效率的有效方法。然而,將不同的成纖維細胞生長因子與含有肝素的聚合物水凝膠結合應用于創(chuàng)面修復,通常導致不同的傷口愈合效果,并且生長因子誘導傷口愈合的潛在機制仍然不是十分清楚。因此,我們制備了溫敏性肝素泊洛沙姆(HP)水凝膠與不同的成纖維細胞生長因子(aFGF和bFGF)結合,用于在體的創(chuàng)面愈合研究。本研究旨在對未

2、來開發(fā)基于肝素的聚合物結合生長因子的創(chuàng)傷敷料應用于皮膚損傷提供一定參考價值。
  方法:使用自主合成的新型材料HP水凝膠,選取“夾心冷法”進行制備,分別加入aFGF和bFGF得到HP-aFGF和HP-bFGF水凝膠,并對其溫敏性、流變學、微觀形態(tài)結構和釋放率進行測定。
  為了評價水凝膠用于創(chuàng)面修復的效果,本課題建立C57BL/6小鼠全層皮膚切除創(chuàng)傷模型。所有動物通過腹膜內注射4%水合氯醛(0.1mL/10g)麻醉,并切除背

3、部面積。使用6-0尼龍縫合線將0.5mm厚的環(huán)形膠圈(外徑16mm,內徑8mm)固定在背中線的任一側上。使用6mm圓形皮膚活檢穿孔器制備兩個全厚度皮膚傷口。
  選取42只健康的C57BL/6小鼠,隨機分成六組。每組分別是生理鹽水組、空白載體肝素泊洛沙姆組(HP)、游離的酸性成纖維細胞生長因子組(aFGF)、游離的堿性成纖維細胞生長因子組(bFGF)、肝素泊洛沙姆結合酸性成纖維細胞生長因子組( HP-aFGF)和肝素泊洛沙姆結合堿

4、性成纖維細胞生長因子組(HP-bFGF),單劑量(1.6μg生長因子/創(chuàng)面)給藥。為了避免交叉污染,所有傷口接受相同的治療。藥物治療后的第0天、7天、10天、14天和17天測量創(chuàng)面面積,計算創(chuàng)面愈合率。創(chuàng)面愈合率(%)=(造模第一天創(chuàng)面面積—取材日創(chuàng)面面積)/造模第一天創(chuàng)面面積×100%。在給藥后第7天和第17天處死小鼠,立即取其傷口周圍皮膚組織用于組織學評價。HE染色、馬森三色染色評價組織形態(tài)變化以及膠原的產生;免疫組織化學染色檢測組

5、織中細胞角蛋白、PCNA、I型膠原蛋白和III型膠原蛋白的表達;免疫熒光觀察組織切片中血小板內皮細胞粘附因子(CD31)的表達,評價血管再生情況。
  結果:
  1.體外實驗表明,本實驗制備的水凝膠具有良好的溫敏性,SEM鏡下觀察可見許多彼此相互連接的海綿狀結構,有利于生長因子通過這些多孔三維網絡立體結構擴散并實現其釋放。兩種水凝膠釋放系統(tǒng)均表現出aFGF和bFGF的持續(xù)釋放超過10天。當與HP-bFGF水凝膠釋放的bFG

6、F(釋放量約24.3%)相比,HP-aFGF釋放更多的aFGF(釋放量接近42.8%),表明不同的生長因子在與含有肝素的水凝膠進行結合時產生的差異,影響了之后生長因子從水凝膠材料中的釋放行為。
  2.體內實驗表明,HP-aFGF水凝膠組在每個時間點顯示出最高的創(chuàng)面愈合率,并且在第17天創(chuàng)面愈合率達到96.1±6.4%,給予其他創(chuàng)傷敷料組的創(chuàng)面愈合率以降序排列為:HP-bFGF水凝膠組(91.3±10.9%),游離的bFGF組(7

7、2.9±11.8%),游離的aFGF組(68.8±9.3%),單純的HP敷料組(65.8±13.6%)和給予生理鹽水組(60.8±18.4%)。這些數據表明在傷口愈合過程的早期階段,HP和aFGF之間的協(xié)同相互作用在創(chuàng)口部位起到更有效的促進創(chuàng)面愈合作用。
  3.蘇木精-伊紅染色和馬森三色染色表明HP-aFGF和HP-bFGF水凝膠改善肉芽組織的形成和促進膠原沉積,其中HP-aFGF水凝膠顯示出比HP-bFGF水凝膠相對更高的促進

8、肉芽組織生產和膠原沉積能力。
  4.免疫組織化學染色結果表明HP-aFGF和HP-bFGF水凝膠在創(chuàng)傷部位能夠持續(xù)釋放生長因子,從而上調細胞角蛋白、PCNA、I型膠原蛋白和III型膠原蛋白的表達,促進細胞外基質(ECM)的形成,有利于細胞增殖和細胞遷移,其中以HP-aFGF水凝膠效果最佳。
  5.免疫熒光染色結果表明相比于其它實驗組,HP-aFGF和HP-bFGF水凝膠都能促進新生血管的生成,其中HP-aFGF水凝膠組有

9、更多的CD31表達。
  結論:與對照組和單純HP水凝膠組相比,其它四個實驗組的創(chuàng)面愈合效果均有提高,但相比于單獨使用成纖維細胞生長因子,HP-aFGF和HP-bFGF水凝膠在促進傷口閉合,肉芽組織形成,再上皮化,促進新生血管生成,上調PCNA和膠原蛋白的表達表現出卓越的治療效果。其中, HP-aFGF水凝膠敷料比HP-bFGF水凝膠敷料表現出更高的促愈合效果,表明不同的成纖維細胞生長因子由于其表面電荷性質的不同,影響其與HP水凝

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