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文檔簡介
1、目的:通過研究GC-MSC對健康人PBMC中Treg、Th17細(xì)胞平衡的影響探討 GC-MSC對胃癌微環(huán)境的免疫調(diào)節(jié)功能,從而為后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究GC-MSC促進(jìn)胃癌的發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)制提供重要依據(jù)。
方法:通過組織貼壁法分離培養(yǎng)臨床病人胃癌及癌旁組織中的GC-MSC及GCN-MSC,并通過成脂誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)、成骨誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)及表面標(biāo)記的檢測鑒定GC-MSC。使用 GC-MSC-CM及直接共培養(yǎng)的方式作用于健康人PBMC,在作用后的第3天、第
2、6天流式檢測PBMC中Th17、Treg細(xì)胞比例,探究GC-MSC對健康人PBMC中Treg、Th17細(xì)胞比例的影響。使用GC-MSC-CM作用于健康人CD4+Na?ve T細(xì)胞,在第6天流式檢測Treg、Th17細(xì)胞比例,探究 GC-MSC對 Treg、Th17細(xì)胞分化的影響。使用CFSE標(biāo)記健康人PBMC然后使用GC-MSC-CM連續(xù)處理6天,在第3天、第6天檢測 PBMC中Treg、Th17細(xì)胞CFSE表達(dá)情況,研究GC-MSC對
3、Treg、Th17細(xì)胞增殖的影響。
結(jié)果:從臨床胃癌組織中成功分離培養(yǎng)了高純度的GC-MSC。GC-MSC-CM可以使健康人PBMC中Treg細(xì)胞比例升高,Th17細(xì)胞比例降低,與GC-MSC直接共培養(yǎng)后PBMC中Th17細(xì)胞比例也出現(xiàn)明顯減少,但是 Treg細(xì)胞比例沒有明顯改變。GC-MSC-CM可以誘導(dǎo)健康人CD4+Na?ve T細(xì)胞向Treg細(xì)胞分化,但不能誘導(dǎo)CD4+Na?veT細(xì)胞向Th17細(xì)胞分化。GC-MSC-C
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