PI3K-Akt信號通路在肝母細(xì)胞瘤的作用及肝母細(xì)胞瘤預(yù)后危險因素的評估.pdf

1、第一部分:PI3K-Akt信號通路在肝母細(xì)胞瘤的作用
　　研究背景:
　　肝母細(xì)胞瘤(hepatoblastoma，HB)是兒童最常見的肝臟惡性腫瘤。近20年來由于肝腫瘤切除手術(shù)和化療的優(yōu)化結(jié)合，術(shù)前術(shù)后化療方案的個體化措施的發(fā)展，肝母細(xì)胞瘤患兒的預(yù)后有了很大的改善。PI3K-Akt通路是一個經(jīng)典的抗凋亡、促存活的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，在腫瘤發(fā)生、增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。
　　研究目的:
　　本研究通過分析PI3

2、K、AKT在肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞系及其腫瘤和癌旁組織的表達(dá)情況，了解PI3K-Akt通路在肝母細(xì)胞瘤中的重要意義，為后續(xù)開發(fā)通過抑制該通路治療肝母細(xì)胞瘤的靶向藥物提供理論依據(jù)。
　　研究方法:
　　我們通過差異基因表達(dá)篩查發(fā)現(xiàn)PI3K-Akt通路的相關(guān)因子包括PI3K，Akt，PKC，PKB及GSK-3等在腫瘤組織中特異性的高表達(dá)。利用MTT法測定LY294002作用前后肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞系HuH-6和HepG2的增殖;通過Weste

3、rn blot分析PI3K通路抑制劑LY294002對肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞系中PI3K、Akt表達(dá)的影響;RT-PCR檢測PI3KmRNA在腫瘤和癌旁組織的表達(dá)差異;Western blot檢測PI3K、p-Akt(Ser473)以及總的Akt蛋白在腫瘤和癌旁組織的差異。
　　結(jié)果:
　　本研究中，我們發(fā)現(xiàn)HuH-6和HepG2細(xì)胞對不同濃度的PI3K抑制劑LY294002處理具有劑量依懶性增殖抑制;同時，隨著PI3K通路抑制劑L

4、Y294002濃度的增加，PI3K、p-Akt(Ser473)蛋白在HuH-6和HepG2細(xì)胞中的表達(dá)逐漸下降，且各組之間的差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.001); PI3K mRNA在腫瘤組織中的表達(dá)顯著高于癌旁組織; PI3K和p-Akt(Ser473)蛋白在腫瘤組織的表達(dá)顯著高于癌旁組織。而總的Akt和β-actin在兩組病人中無顯著差別。
　　結(jié)論:
　　PI3K-Akt通路的激活可致使肝母細(xì)胞瘤腫瘤細(xì)胞增殖，相關(guān)基因

5、在腫瘤組織的表達(dá)顯著高于癌旁組織，提示PI3K-Akt通路在肝母細(xì)胞瘤的發(fā)生發(fā)展中起到了重要的作用。
　　第二部分肝母細(xì)胞瘤預(yù)后危險因素的評估
　　研究背景:
　　肝母細(xì)胞瘤(hepatoblastoma，HB)是兒童最常見的肝臟惡性腫瘤，化療敏感的患兒術(shù)后具有較高的總體生存率（3年生存率在75％以上）。盡管如此，肝母細(xì)胞瘤患兒的預(yù)后仍存在較大差異，因?yàn)槎鄠€危險因素與其預(yù)后密切相關(guān)。
　　研究目的:
　　本

6、研究的目的是確定與亞洲人群肝母細(xì)胞瘤患兒預(yù)后相關(guān)的危險因素，并分析影響患兒無事件生存（Event-Free Survival，EFS）的各個危險因素之間的相互關(guān)系。
　　研究方法:
　　回顧性分析首都兒科研究所附屬兒童醫(yī)院2001年1月至2014年9月行肝腫瘤切除術(shù)的肝母細(xì)胞瘤患兒共176例，采用Kaplan-Meier生存曲線分析和Cox比例風(fēng)險模型評估與肝母細(xì)胞瘤相關(guān)的危險因素。
　　結(jié)果:
　　所有患兒（1

7、76例）的中位無事件生存時間為80.4個月(95％ CI:71.6-89.2)及5年無事件生存率(EFS)54.6％，五年總體生存率(OS)66.7％。肝母細(xì)胞瘤患兒預(yù)后與AFP水平、腫瘤單發(fā)多發(fā)、PRETEXT分期、有無轉(zhuǎn)移、病理分型有關(guān)。多因素分析結(jié)果顯示:AFP水平(HR:2.567，P=0.014)，腫瘤是否多發(fā)(HR:2.187，P=0.028)，腫瘤是否轉(zhuǎn)移(HR:1.912，P=0.028)以及PRETEXTⅣ期(HR:2

8、.254，P=0.005)均是影響肝母細(xì)胞瘤患兒EFS的獨(dú)立為危險因素。不同的病理分型分組相互影響，分別引入多因素Cox模型中進(jìn)行分析提示，完全胎兒型(HR:2.752，P=0.021)是影響肝母細(xì)胞瘤患兒EFS的獨(dú)立為危險因素。
　　結(jié)論:
　　肝母細(xì)胞瘤患兒預(yù)后與AFP水平、腫瘤單發(fā)多發(fā)、PRETEXT分期、有無轉(zhuǎn)移、病理分型有關(guān)。腫瘤的病理分型與其他各因素之間存在著相互作用，不同危險因素的存在進(jìn)一步影響病理分型對于預(yù)后