中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病診斷用細(xì)胞芯片的研究.pdf

1、隨著感染性疾病發(fā)病率的上升以及病因復(fù)雜情況的日趨嚴(yán)重，臨床上對(duì)于快速、準(zhǔn)確篩查病原體，以便采取及時(shí)有效治療的要求也隨之日益迫切。對(duì)于多種病原微生物感染的篩查，德國(guó)已有商業(yè)化的產(chǎn)品用于實(shí)驗(yàn)室診斷，而國(guó)內(nèi)目前處于研究階段，尚無(wú)臨床診斷用的產(chǎn)品。本研究以細(xì)胞芯片為技術(shù)平臺(tái)，選取10種引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的常見(jiàn)、高發(fā)病毒作為研究對(duì)象，建立了一種對(duì)引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的病原體進(jìn)行快速、高通量鑒別的新方法。 引進(jìn)ATCC標(biāo)準(zhǔn)病毒

2、株和CCTCC細(xì)胞株，采用經(jīng)典的病毒/細(xì)胞培養(yǎng)法，確定病毒感染細(xì)胞的最佳培養(yǎng)條件(最佳病變度、最適接種濃度、培養(yǎng)時(shí)間)，制備中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病診斷細(xì)胞芯片，用商業(yè)化單抗制品進(jìn)行質(zhì)量控制及間接免疫熒光法檢測(cè)，確立了陽(yáng)性判斷的標(biāo)準(zhǔn)和典型熒光模型。根據(jù)判別標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性質(zhì)控血清樣本進(jìn)行回代檢測(cè)分析，結(jié)果表明，該法可準(zhǔn)確有效地對(duì)相關(guān)病原體進(jìn)行鑒別診斷。 將中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病診斷細(xì)胞芯片與德國(guó)歐蒙實(shí)驗(yàn)室同類(lèi)產(chǎn)品進(jìn)行對(duì)比檢測(cè)，細(xì)胞

3、芯片法對(duì)于歐蒙實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品未準(zhǔn)確檢出的2例標(biāo)本可準(zhǔn)確檢出，特異性較高，準(zhǔn)確檢出率(20/20)略高于德國(guó)歐蒙實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品(18/20)；且細(xì)胞芯片法操作更為簡(jiǎn)便，病原微生物組合更有針對(duì)性，更適合中國(guó)人群感染性疾病的檢測(cè)。 應(yīng)用所制備的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病診斷細(xì)胞芯片，選取100例臨床標(biāo)本(85例陽(yáng)性，15例陰性)進(jìn)行中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的病毒分類(lèi)檢測(cè)，檢出93例與臨床檢測(cè)結(jié)果相符，其中85例陽(yáng)性標(biāo)本準(zhǔn)確檢出78例，15例陰性標(biāo)本