蛹蟲(chóng)草多肽制備分離及功能口服液加工工藝研究.pdf

1、蛹蟲(chóng)草是一種和冬蟲(chóng)夏草同屬異種的藥食兼用真菌，研究表明蛹蟲(chóng)草含有與冬蟲(chóng)夏草相近的功能物質(zhì)及藥用功效。蛹蟲(chóng)草主要的活性成分主要是蟲(chóng)草多糖、腺苷、甘露醇、SOD酶和一些微量元素。當(dāng)前報(bào)道較多的是關(guān)于蟲(chóng)草素和蟲(chóng)草多糖，而關(guān)于蛋白質(zhì)制備多肽類(lèi)的研究及其保健品的開(kāi)發(fā)較少。本研究主要內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　以蛹蟲(chóng)草子實(shí)體為原料，測(cè)定了蛹蟲(chóng)草子實(shí)體基本成分和主要功能成分，其含量為:蛋白質(zhì)28.73％，蟲(chóng)草多糖21.85％，腺苷1.20％，蟲(chóng)草素1

2、.08％，甘露醇3.824％。
　　本文采用堿提酸沉法提取蛹蟲(chóng)草子實(shí)體中的蛋白質(zhì)。分別通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)提取方法進(jìn)行優(yōu)化。最終得到堿法提取蛹蟲(chóng)草蛋白的最佳提取條件為:NaOH溶液濃度0.15mol/l，料液比1∶17.5，提取時(shí)間120min。采用酸沉法沉降蛹蟲(chóng)草蛋白，分析得到pH4.6是蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。
　　選取蛋白酶復(fù)合酶解，以水解度DH為指標(biāo)，通過(guò)單因素和響應(yīng)面試驗(yàn)對(duì)水解條件進(jìn)行優(yōu)化，最終確定水解的最佳條件為反

3、應(yīng)時(shí)間為7.00h，pH為9.15，反應(yīng)溫度為52.59℃，此時(shí)水解度最大，將此條件下的酶解液冷凍干燥。
　　利用Tricine-SDS-PAGE電泳和葡聚糖凝膠層析對(duì)蛹蟲(chóng)草多肽進(jìn)行初步分離純化，分析了蛹蟲(chóng)草多肽的分子量范圍。電泳結(jié)果表明，酶解法制備的蛹蟲(chóng)草多肽分子量主要集中分布在4722～7547Da附近;凝膠層析結(jié)果表明，酶解法制備的蛹蟲(chóng)草多肽分子量主要分布在6674～28333Da和296～5343Da，多肽是小分子物質(zhì)，可

4、知酶解液中分離的多肽分子量主要集中在296～5343Da。
　　選用體外化學(xué)模擬體系測(cè)定了蛹蟲(chóng)草多肽的超氧陰離子自由基(O2-)清除能力，DPPH-自由基清除能力、羥自由基(-OH)清除能力和還原能力，當(dāng)蛹蟲(chóng)草多肽濃度為1.0mg/ml時(shí)，超氧陰離子自由基(O2-)清除率，DPPH-自由基清除率、羥自由基(-OH)清除率分別為37.80％、46.34％和43.21％，說(shuō)明復(fù)合蛋白酶酶解制備的蛹蟲(chóng)草多肽具有一定的清除自由基和抗氧化的

5、能力。
　　采用平板濾紙法考察蛹蟲(chóng)草多肽的抑菌活性。試驗(yàn)結(jié)果顯示，蛹蟲(chóng)草多肽對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌和沙門(mén)氏菌的抑菌結(jié)果均為陰性，表明酶法制備的蛹蟲(chóng)草多肽對(duì)上述四種菌沒(méi)有抑菌活性。
　　研究了多肽口服液的生產(chǎn)工藝流程。酶解法制備的多肽液采用活性炭、β-環(huán)狀糊精和蘋(píng)果酸進(jìn)行脫苦處理，主要添加白砂糖、檸檬酸、蜂蜜和甘氨酸進(jìn)行調(diào)配，以感官評(píng)定為指標(biāo)確定最佳配方組合，這四種物質(zhì)的添加量為:白砂糖10％，蜂蜜3％，檸檬