氧化應激和CaMKII在βAR持久激動誘發(fā)心肌肥厚中的作用.pdf

1、目的：
　　本研究應用含硫氧基的抗氧化物N-乙酰半胱氨酸(N-acety1 cysteine，NAC)對異丙腎上腺素(isoproterenol，ISO)誘導的心肌肥厚大鼠進行實驗性抗氧化治療，觀察其對大鼠心肌肥厚的組織學、心肌氧化應激水平及CaMKⅡ表達的影響，探討持久興奮βAR誘發(fā)心肌肥厚機制中CaMKⅡ和氧化應激的作用及其相關性。
　　方法：
　　健康雄性wistar大鼠，體重180～200g，隨機分成4組：正常

2、對照組(CTRL)，ISO處理組(ISO)，正常NAC組(CTRL+NAC)和 ISO處理NAC組(ISO+NAC)，每組6只。ISO給藥方法是ISO及ISO+NAC組動物每天腹腔注射ISO(3mg/kg/d)，CTRL及CTRL+NAC組腹腔注射相同體積的生理鹽水；NAC給藥方法：CTRL+NAC及ISO+NAC組動物每日自由飲用含15g/L NAC的飲用水。每周用無創(chuàng)動脈血壓儀檢測鼠尾動脈血壓，連續(xù)2周；于第二周末麻醉下處死動物，以

3、心重指數(shù)(HW/BW)和左心室組織HE染色檢測心肌肥厚情況；熒光測定法檢測心肌線粒體ROS水平；Western blot檢測左室心肌NADPH氧化酶NOX4以及有活性的CaMKⅡ(p-CaMKⅡ/CaMKⅡ)的表達變化。
　　結果：
　　(1)ISO處理組大鼠心重指數(shù)(HW/BW)明顯高于CTRL組[(4.23±0.19 vs2.82±0.04)mg/g，P<0.05]，HE染色顯示ISO組與CTRL組相比，心肌細胞橫截面積

4、明顯增大[(1422.40±48.35 vs784.30±22.08)μm，P<0.05]；NAC顯著降低了ISO誘導的心重指數(shù)[(3.54±0.10 vs4.23±0.19)mg/g，P<0.05]及心肌細胞橫截面積的增加[(994.90±48.03 vs1422.40±48.35)μm，P<0.05]。(2)ISO處理組大鼠心肌線粒體ROS生成水平顯著升高，明顯高于CTRL組[(0.50±0.04 vs0.26±0.02)u/s.m

5、，P<0.05]，NAC處理顯著降低了ISO誘導的心肌線粒體ROS過度生成[(0.27±_0.01 vs0.50±0.04)u/s.m，P<0.05]。(3)NOX4蛋白表達變化與上述ROS水平變化相一致，ISO刺激顯著上調(diào)了NOX4蛋白表達，ISO組的NOX4蛋白表達是CTRL組的1.4倍，NAC處理有效抑制ISO誘發(fā)的NOX4表達上調(diào)(P<0.05)。(4)ISO處理組心肌組織有活性的CaMKⅡ表達(p-CaMKⅡ/CaMKⅡ)是C

6、TRL組的1.6倍，CTRL+NAC組與ISO組相比，表達量下降了(P<0.05)，提示NAC明顯降低了其表達的增加。(5)鼠尾動脈血壓在4組實驗動物間無統(tǒng)計學差異；ISO組較CTRL組，心率明顯下降[(297±11vs370±3)mmHg，P<0.05]，ISO+NAC組與ISO組之間無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。(6)CTRL+NAC組各項指標與CTRL組大鼠無差異。
　　結論：
　　氧化應激信號和CaMKⅡ均在βAR誘