促酰化蛋白誘導(dǎo)前脂肪細(xì)胞的分化研究及脂源性激素變化的臨床意義研究.pdf

1、目的:研究促酰化蛋白(ASP,Acylation Stimulating Protein)誘導(dǎo)前脂肪細(xì)胞分化的作用及機(jī)制.觀察ASP誘導(dǎo)前脂肪細(xì)胞(Preadipocytes)分化過程中的形態(tài)學(xué)變化,測定分化過程中甘油三酯(Triglyceride,TG)合成及在分化細(xì)胞中的累積情況:觀察分化過程中前脂肪細(xì)胞的克隆增殖;檢測ASP誘導(dǎo)脂肪細(xì)胞過程中特異性分化轉(zhuǎn)錄因子過氧化物酶體增殖物活化受體γ、CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α和CCAAT/

2、增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ mRNA表達(dá)水平及時(shí)序性變化;并觀察脂肪細(xì)胞特異性功能蛋白脂蛋白脂酶、二酰基甘油轉(zhuǎn)酰酶和脂素的表達(dá)規(guī)律;分析ASP誘導(dǎo)分化過程中脂肪細(xì)胞基因表達(dá)譜的改變,篩選與分化相關(guān)的基因,從而探討ASP誘導(dǎo)前脂肪細(xì)胞分化的分子生物學(xué)機(jī)制.以期進(jìn)一步深化生命科學(xué)界對ASP這一調(diào)控脂肪代謝的新型激素的認(rèn)識,從新的研究領(lǐng)域認(rèn)識脂肪細(xì)胞分化的分子機(jī)制,并為肥胖癥和胰島素抵抗的防治開拓新思路.結(jié)論:1.新型脂源性激素ASP能夠誘導(dǎo)3T3-L

3、1前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化.2.ASP能夠顯著增加3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化過程中脂肪細(xì)胞中的甘油三酯合成和積累.3.ASP能夠刺激處于生長停滯期的3T3-L1前脂肪細(xì)胞重新進(jìn)入細(xì)胞增殖周期,發(fā)生克隆增殖.4.ASP可以誘導(dǎo)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化過程中,不同類型的分化轉(zhuǎn)錄因子C/EBPδ、C/EBPα和PPARγ的表達(dá)具有一定的時(shí)序性,分化早期出現(xiàn)的C/EBPδ表達(dá),隨后進(jìn)一步誘導(dǎo)C/EBPα和PPARγ的表達(dá);C/EBPα和P