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文檔簡介
1、目的:
(1)闡明KiSS-1基因在鼻咽癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用。
(2)評價轉(zhuǎn)染KiSS-1基因的EPCs在鼻咽癌防治中的應用價值。
方法:
(1)構(gòu)建含KiSS-1重組質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染人臍靜脈血分離培養(yǎng)的血管內(nèi)皮祖細胞(Endothelial Progenitor Cells,EPCs),獲得高表達 KiSS-1基因的穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞(KiSS-1-EPCs);
(2)構(gòu)建鼻咽癌荷瘤裸鼠模型并通過其尾靜
2、脈注入KiSS-1-EPCs;
(3)觀察KiSS-1-EPCs對腫瘤及其轉(zhuǎn)移灶的影響。
結(jié)果:通過密度梯度離心法和6%羥乙基淀粉沉降法成功從人臍血獲得內(nèi)皮祖細胞,并完成對其培養(yǎng)、傳代、擴增和鑒定;完成將KiSS-1基因轉(zhuǎn)染進人臍血內(nèi)皮祖細胞,并通過western blot的方法對轉(zhuǎn)染后的內(nèi)皮祖細胞進行鑒定;建立了穩(wěn)定的鼻咽癌裸鼠肺轉(zhuǎn)移模型;將轉(zhuǎn)染過KiSS-1重組質(zhì)粒的EPCs(KiSS-1-EPCs)經(jīng)裸鼠尾靜脈
3、注入鼻咽癌裸鼠體內(nèi),每只老鼠注入細胞的濃度為2×106/mL,并將其作為實驗組;再將未轉(zhuǎn)染過KiSS-1重組質(zhì)粒的單純EPCs,以同等濃度經(jīng)裸鼠尾靜脈注入鼻咽癌裸鼠體內(nèi),并將其作為對照組。結(jié)果顯示,實驗組和對照組移植瘤的重量分別為1.385±0.207g,1.474±0.229g,兩組數(shù)據(jù)之間無統(tǒng)計學上的差異(P>0.05),兩組肺臟的轉(zhuǎn)移灶生成率分別是5%,30%,具有統(tǒng)計學上的差異(P<0.05),肺臟的轉(zhuǎn)移灶數(shù)目分別是19.00,
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