地塞米松引起星形膠質(zhì)細(xì)胞周期阻滯及凋亡機(jī)制的研究.pdf

1、哺乳動物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)由約一千億個神經(jīng)元和約十倍以上的膠質(zhì)細(xì)胞組成,膠質(zhì)細(xì)胞最早是在1859年由德國解剖學(xué)家Rudolf Virchow發(fā)現(xiàn)的,他當(dāng)時形容膠質(zhì)細(xì)胞是一種"神經(jīng)膠",把神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的各種成分粘合在一起,膠質(zhì)細(xì)胞的名稱由此而來.后來在19世紀(jì)后期Golgi和Cajal根據(jù)金屬浸染法對膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行分類和命名,膠質(zhì)細(xì)胞被分成星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞,其中以星型膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量最多、分布最廣.此后近百年,對星型膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)

2、和功能的研究沒有取得重大進(jìn)展,星型膠質(zhì)細(xì)胞一直被認(rèn)為只對神經(jīng)元起結(jié)構(gòu)、代謝和營養(yǎng)上的支持作用,最近二十多年隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,對星型膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)特征和機(jī)能活動有了更深入的了解,它在神經(jīng)系統(tǒng)的正常生理活動、腦的發(fā)育和神經(jīng)病理過程中具有重要作用.星型膠質(zhì)細(xì)胞不但參與多種生理活動,如神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、突觸的傳遞、保持神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等,另外在一些病理條件下,如腦外傷、感染、缺血、癲癇、腦腫瘤以及神經(jīng)退行性病變等,星型膠質(zhì)細(xì)胞也發(fā)揮著重要的

3、作用.在這些病理條件下,星型膠質(zhì)細(xì)胞通常被激活,出現(xiàn)增殖活躍、細(xì)胞體和突起肥大、膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)高表達(dá)等特征,也就是所謂的反應(yīng)性膠質(zhì)細(xì)胞增生.這種反應(yīng)性增生一方面被看作是機(jī)體的一種自我保護(hù)機(jī)制,因為它可以限制炎癥的擴(kuò)散、減輕損害,被激活的星型膠質(zhì)細(xì)胞還可以產(chǎn)生神經(jīng)營養(yǎng)因子促進(jìn)神經(jīng)元的存活和修復(fù);另一方面,過度地增生往往形成膠質(zhì)疤痕,這樣會限制軸突的生長、髓鞘的通過,從而妨礙正常神經(jīng)環(huán)路的連通,膠質(zhì)疤痕也可能成為日后癲癇發(fā)作

4、的病灶.因此,反應(yīng)性膠質(zhì)細(xì)胞增生對機(jī)體來說是既有利又有弊.地塞米松(Dexamethasone),一種人工合成的糖皮質(zhì)激素,為了探討地塞米松引起體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞周期阻滯及凋亡機(jī)制,我們做了如下的研究.第一部分,我們把體外純化培養(yǎng)的新生大鼠大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞分成四組種在玻片上,一個對照組,三個實驗組,對照組不加地塞米松,三個實驗組分別加入終濃度為10<'-5>、10<'-4>、10<'-3>mol/L的地塞米松,共同孵育24小時后,

5、用SABC免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測CyclinE和Cyclin A的表達(dá),并以圖像分析儀測定免疫細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)物的光密度值.第二部分,我們主要探討了地塞米松誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的機(jī)制,結(jié)論:與對照組比較,10<'-5>、10<'-4> mol/L濃度組地塞米松抑制了Cyclin E和Cyclin A的表達(dá),使星形膠質(zhì)細(xì)胞滯留于G1期和S期;10<'-3> mol/L濃度組地塞米松促進(jìn)了P53和Bax的高表達(dá),同時抑制了Bcl-2的表達(dá),Bax