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文檔簡介
1、本文對腺病毒介導(dǎo)的KDRP-CDglyTK-GFP系統(tǒng)對胃癌細(xì)胞靶向殺傷作用及機(jī)制進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。主要內(nèi)容如下： 1．對融合基因的重組腺病毒進(jìn)行包裝與擴(kuò)增、純化與鑒定，制備了高純度、高滴度的含目的基因的重組腺病毒； 2．?dāng)y帶目的基因的重組腺病毒對SCG7901、ECV304、HepG2細(xì)胞的形態(tài)及生長特性方面無影響； 3． Ad-KDR-CDglyTK雙自殺基因可在體外靶向殺傷SCG7901、ECV304細(xì)胞。聯(lián)
2、合給藥可產(chǎn)生明顯的協(xié)同作用； 4．首次觀察到Ad-KDR-CDglyTK雙自殺基因體系在SCG7901、ECV304細(xì)胞中存在旁觀者效應(yīng)；并可在體外誘導(dǎo)SCG7901、ECV304細(xì)胞的凋亡； 5．首次應(yīng)用FRAP技術(shù)證實(shí)SCG790l、ECV304、HepG2細(xì)胞間通訊功能與縫隙連接有一定關(guān)系，而Hela細(xì)胞不存在細(xì)胞問通訊功能。上調(diào)劑可以擴(kuò)大SCG7901細(xì)胞的旁殺效應(yīng)； 6．首次觀察到雙自殺基因系統(tǒng)在SCG
3、7901細(xì)胞中的旁觀者效應(yīng)機(jī)制可能與細(xì)胞間的縫隙連接、細(xì)胞凋亡有一定關(guān)系； 7．應(yīng)用SCG7901可成功建立胃癌移植瘤裸鼠普通動(dòng)物模型，將為研究人胃癌治療實(shí)驗(yàn)提供可靠的研究工具； 8．重組腺病毒轉(zhuǎn)基因荷瘤動(dòng)物腫瘤組織內(nèi)可檢測到CDglyTK融合基因產(chǎn)物的表達(dá)，該治療體系具有較滿意的體內(nèi)抑瘤作用，表現(xiàn)為腫瘤的生長抑制、瘤體微血管密度減少等； 9．雙自殺基因系統(tǒng)可以在體內(nèi)誘導(dǎo)荷瘤胃癌裸鼠腫瘤細(xì)胞的凋亡； 10
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