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1、目的:探討在Aβ25-35誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元tau蛋白過度磷酸化中,人參皂苷Rb1對(duì)周期依賴性蛋白激酶(cyclin-dependentkinase5,CDK5)的激動(dòng)亞基p35/p25的影響。 方法:選用孕期的清潔級(jí)SD(Sprague-Dawley,SD)大鼠,分離純化胎鼠海馬神經(jīng)元,選擇適宜濃度的凝聚態(tài)Aβ25-35,作用于海馬神經(jīng)元不同時(shí)間,選擇tau蛋白磷酸化水平最高的時(shí)間點(diǎn),通過蛋白免疫印跡法和免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)胎
2、鼠海馬神經(jīng)元CDK5的兩個(gè)亞基cdk5和p35/p25的蛋白水平,以及CDK5的磷酸化底物tau蛋白在Thr205、Ser396和Sr404位點(diǎn)的磷酸化水平。 結(jié)果:凝聚態(tài)Aβ25-35(20μmol/L)作用于海馬神經(jīng)元12h,可使海馬神經(jīng)元中p25的蛋白水平和p25/p35的比值增高,以及tau蛋白在Thr205、Ser396和Ser404位點(diǎn)的磷酸化水平增高,但對(duì)cdk5亞基表達(dá)水平影響并不明顯。Rb1和calpain特異
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