TERT-CLPTM1L區(qū)域基因多態(tài)與中國男性肝癌易感性的研究.pdf

1、前言：
　　原發(fā)性肝癌是世界范圍內，位列第五的常見惡性腫瘤，位列男性惡性腫瘤死亡原因的第二位。在全世界范圍內，肝癌位列女性惡性腫瘤發(fā)病的第七位和死亡的第六位。相關報道指出，肝癌的高發(fā)病率主要集中在東亞和東南亞國家。肝細胞癌(HCC)代表了原發(fā)性肝癌的主要組織學亞型，占所有肝癌的85％-90％。與此同時，世界范圍內許多國家肝癌的發(fā)病率正在逐年增加。肝癌的發(fā)生是一個多因素、多階段的過程，包括遺傳和環(huán)境等因素。同時長期的致癌效應作用于機

2、體引起相關的基因突變，從而導致腫瘤的形成。近年來，許多文獻都研究了一些相關的基因多態(tài)性與肝癌易感性之間的關系。
　　染色體5p15.33區(qū)域，該區(qū)域存在兩個已知的基因，分別是基因端粒酶逆轉錄酶(human relomerase reverase transcriptase，TERT)和唇腭裂跨膜蛋白1樣蛋白(cleft and palate transmembrane1 like，CLPTM1L)。據報道這兩個基因已經被發(fā)現與多種

3、癌癥的發(fā)展相關。端粒酶是一種由RNA和蛋白質組成的核糖核蛋白復合體，屬于反轉錄酶。端粒酶在保持端粒穩(wěn)定、基因組完整、細胞長期的活性和潛在的繼續(xù)增殖能力等方面存在重要作用。人類的端粒酶以自身的RNA作為端粒DNA復制的模板。最近的研究表明，基因端粒酶逆轉錄酶(TERT)的激活可能會促進腫瘤的進展并且調節(jié)腫瘤形成的途徑。端粒酶活性在人類惡性腫瘤中的表達率為85％左右，而正常人體細胞中卻檢測不到有活性的端粒酶，只有在那些不斷分裂復制的細胞中才

4、可以偵測到具有活性的端粒酶。唇腭裂跨膜蛋白1樣蛋白.(CLPTM1L)編碼預測跨膜蛋白，在順鉑耐藥性細胞系誘導細胞凋亡，在皮膚、肺、卵巢、宮頸、胸腺等多種正?；驉鹤兊慕M織中均有表達。然而，CLPTM1L的功能以及其在腫瘤發(fā)生中的作用尚不清楚。迄今為止，許多研究已經證明，TERT和CLPTM1L單核苷酸多態(tài)性與癌癥的發(fā)病風險相關。TERT基因rs2736098位點和CLPTM1L基因rs401681位點的基因多態(tài)性與膀胱癌、肺癌等許多惡性

5、腫瘤的易感性相關。本次研究采用病例對照的設計方法，分析TERT基因rs2736098位點和CLPTM1L基因rs401681位點的基因多態(tài)性與沈陽市男性肝癌發(fā)生風險的關系，為肝癌的防治提供依據。
　　實驗對象與方法：
　　本研究采取病例對照研究的方法，以沈陽市三級甲等醫(yī)院2008年-2013年，年齡范圍在30-87歲之間的肝癌患者201例為研究對象，用頻數匹配的方法選擇同期在體檢中心體檢的相同性別、相同民族，年齡范圍±5歲的

6、211例健康男性作為對照。收集所有研究對象的靜脈血，及相關危險因素的資料信息。所有參與者均簽署知情同意書。
　　應用經典酚-氯仿的方法從外周血中提取DNA，采用實時熒光定量PCR(Taqmanreal-time PCR)方法進行DNA擴增，檢測TERTrs2736098和CLPTM1Lrs401681位點基因多態(tài)性的分型結果。用SPSS16.0軟件對數據進行統計分析，人口學特征、相關危險因素以及SNP基因型在病例組和對照組之間的分

7、布是否有差異均采用雙側x2檢驗。所有的統計結果，以P＜0.05作為差異有統計學意義的標準。運用Logistic回歸模型計算各因素的比值比(OR)及其95％可信區(qū)間(95％CI)，分析基因多態(tài)性與肝癌發(fā)病風險間的關系。
　　結果：
　　TERTrs2736098基因多態(tài)性位點T等位基因以及CLPTM1Lrs401681基因多態(tài)性位點T等位基因與肝癌的發(fā)病風險增高有關(OR=1.605，95％CI=1.164-2.213;OR=

8、1.399，95％CI=1.002-1.955)，同時攜帶rs2736098和rs401681T等位基因的人群肝癌的發(fā)病風險顯著增高(OR=4.420，95％CI=2.319-8.425)。吸煙人群中攜帶TERTrs2736098突變基因型(CT+TT)和CLPTM1Lrs401681突變基因型(CT+TT)的個體肝癌發(fā)病風險與非吸煙人群攜帶野生純合基因型(CC)的個體相比，發(fā)病風險顯著增高(OR=2.353，95％CI=1.133-4

9、.887;OR=2.790,95％CI=1.296-6.00)。TERT-CLPTM1L區(qū)域rs2736098和rs401681位點基因多態(tài)與肝癌病程進展的關聯分析顯示差異無統計學意義。
　　結論：
　　1.在男性群體中，TERTrs2736098和CLPTM1Lrs401681T等位基因是肝癌發(fā)生的易感因素。
　　2.同時攜帶TERTrs2736098和CLPTM1Lrs401681T等位基因的個體增加肝癌的發(fā)病風險